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產品名稱:G-Biosciences HOOK 6X His蛋白純化試劑盒
產品貨號:786-630
英文名稱:HOOK™ 6X His Protein Purification
產品品牌:G-Biosciences
產品規格:5
產品簡介:
HOOK™ 6X His 蛋白純化試劑盒允許從細菌培養物中純化可溶性 6X His 標簽蛋白。細菌首先被裂解細菌 PE LB™ 和 PE LB™-溶菌酶釋放總可溶性蛋白質,同時保持蛋白質的結構和活性。6X His 標簽蛋白通過固定化金屬親和層析 (IMAC) 純化,使澄清的裂解液通過預裝柱。
Bacterial-PELB™ 試劑盒已開發用于從細菌細胞中提取可溶性蛋白質。它是對基于溶菌酶的裂解的專有改進,它允許提取可溶性蛋白質并同時去除細胞裂解過程中釋放的核酸(DNA 和 RNA)。Bacterial-PE LB™ 裂解液可消除粘度積聚,從而以較低的離心力實現有效澄清。
HOOK™ 6X His 蛋白純化試劑盒可用于 鎳 螯合固定化金屬親和層析 (IMAC) 柱或 鈷螯合 IMAC 柱。與鎳螯合樹脂相比,鈷螯合樹脂對 6X His 標簽的結合親和力較低,這導致非特異性結合較少,并可能導致產量略低。
HOOK™ 6X His 蛋白純化試劑盒經過優化,可產生 >10mg/250ml 的可溶性 His 標記蛋白培養物,純度為 80-90%,具體取決于蛋白的表達水平、樹脂類型、構象和溶解度特征。
產品特征
從約 250 毫升細菌中分離出 >10 毫克 His 標記的蛋白質
無需超聲處理,隨附裂解緩沖液和酶
可提供鎳或鈷樹脂
產品組分:
貨號 產品名稱 規格
Bacterial PE-LB™ 100ml 100ml
PE LB™
-Lysozyme 2 x 1ml 2 x 1ml
Nickel Chelating Columns* 5
Cobalt Chelating Columns 5
His Binding/Wash Buffer 100ml 100ml
His Elution Buffer 100ml 100ml
產品應用:
用于從細菌中分離 6X His 標記的重組蛋白
產品使用說明;
在使用HOOK™6X His Protein純化試劑盒之前,推薦對你的蛋白質的表達和溶解度水平進行估計。
正常表達蛋白,用Bacterial PE-LB™試劑裂解,澄清
SDS聚丙烯酰胺凝膠的離心和觀察。
•重組蛋白表達的一個固有問題是溶解性。一些
在細菌中表達的蛋白質是不溶的,并定位于包涵體。
提供的細菌PE LB™可以分離包涵體(見附加協議)
這些可以用我們的包絡體增溶(IBS)緩沖液或常用變性劑(8M尿素或6M胍)。
由此產生的可溶性蛋白可以用這個試劑盒,但變性劑和緩沖液中可能需要還原劑來維持蛋白質的溶解性。PELB™溶菌酶:PELB™溶菌酶包含40mg/ml溶菌酶(~80kU)添加800U/ml DNase和24U/ml RNase。我們建議使用PELB™溶菌酶,最終濃度0.1-1mg/ml。溶菌酶水平更高不會提高裂解效率,可能有抑制作用。
為了保持重組蛋白的完整性,建議使用蛋白酶抑制劑混合物在整個純化過程中使用。的使用的凈化技術依賴于金屬螯合,因此要避免使用EDTA或其他金屬螯合劑作為抑制劑的蛋白酶抑制劑混合物。我們推薦RecomProteaseARREST,蛋白酶抑制劑專為從細菌中純化重組蛋白而設計的雞尾酒ProteaseARREST,一種通用的蛋白酶抑制劑可選的EDTA。
•在此之前,樹脂和緩沖液應達到室溫平衡
產品名稱:G-Biosciences HOOK 6X His蛋白純化試劑盒
產品貨號:786-630
關于公司:
Geno科技公司的成立旨在簡化生命科學研究。我們的主要目標是瞄準蛋白質研究的關鍵技術,并找到負擔得起的方法來簡化和改進這些技術。多年來,Geno技術公司已經擴展到其他研究領域,但我們的主要目標仍然是蛋白質,我們的主要目標"簡化和改進這些技術"仍然成立。2010年,隨著"蛋白質人"的演變,這一信息得到了強化,我們的標志性吉祥物和G-BioSciences品牌,Geno科技公司的注冊商標。
G-Biosciences 的團隊檢查了特定實驗技術的方方面面,從蛋白質提取到蛋白質純化和檢測,以確定我們可以瞄準的關鍵領域進行改進。因此,我們現在制造的一切,從簡單的緩沖器在方便的濃度和大小,定制制造的設備,如管O-Dialyzer,增強和簡化關鍵技術。我們重點研究的關鍵領域包括但不限于蛋白質檢測、樣品制備、電泳、西印、質譜測量、檢測開發、抗體生產和蛋白質純化。
G-BioScience現在為蛋白質和生命科學研究市場提供了數千種產品,所有這些產品的設計都希望使研究人員的實驗室時間更簡單、更實惠。