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四種常用的PCR擴增儀的區別
PCR擴增儀,又稱為PCR基因擴增儀、PCR擴增儀、聚合酶鏈反應擴增儀,俗稱PCR儀。PCR儀實際就是一個溫控設備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進行溫度控制,廣泛運用于學、生物學實驗室中。
根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實時熒光定量PCR儀四類。
1、普通PCR儀
一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀稱作傳統PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是用于簡單的、對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應用于科學研究、教學、學臨床、檢驗檢疫等機構。
2、梯度PCR儀
一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度,通常有12種溫度梯度)的PCR儀稱作梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA段,其適退火溫度是不同的,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的適退火溫度,進行有效的擴增。用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣節約成本的同時也節約了時間,多應用于科研、教學機構,檢驗、檢疫等。
3、原位PCR儀
用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀稱作原位PCR儀。如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。不但可以檢測到靶DNA,又能標出靶序列在細胞內的位置,對于在分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨床過程及病理的轉變有重大的實用價值。主要應用于臨床、科研。
4、實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統得出量化的實時結果輸出。熒光定量PCR儀有單通道、雙通道和多通道。主要用于學臨床檢測、生物研發、食品行業、科研院校等機構。