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1. 預(yù)包被板	48T/96T;	6. 樣本稀釋液（5號(hào)液）	1支;
2. 酶結(jié)合物（1號(hào)液）	1支;	7. 終止液（6號(hào)液）	1支;
3. 洗滌液（2號(hào)液）	1支;	8. 陽(yáng)性對(duì)照品	1支;
4. 底物（3號(hào)液）	1支;	9. 陰性對(duì)照品	1支;
5. 顯色劑（4號(hào)液）	1支;	10.使用說(shuō)明書(shū)	1份;

問(wèn)題1：如果我們檢測(cè)的樣本是組織樣本，請(qǐng)問(wèn)應(yīng)該選用什么來(lái)組織勻漿,濃度是多少?
答：一般我們?cè)噭┖械慕M織勻漿，都是按照10%進(jìn)行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液，勻漿液可以選取sheng理鹽水，也可以選取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol.
問(wèn)題2：請(qǐng)問(wèn)我訂購(gòu)了你們的試劑盒，但是樣本是分批次收集的，我可以分批次實(shí)驗(yàn)嗎。
答：可以的，我們的試劑盒橫條是可拆卸的，試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存，下次可以繼續(xù)使用，但是建議是拆封之后一個(gè)月內(nèi)用完。
問(wèn)題3：請(qǐng)問(wèn)各種標(biāo)本的處理方式，你可以發(fā)給我一下嗎？
答：當(dāng)然可以。標(biāo)本要求如下：
在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的，-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞：檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
8.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

人生長(zhǎng)因子（HGH）ELISA Kit操作程序

加樣反應(yīng)：取出所需量的反應(yīng)板條，每孔加樣本稀釋液（5號(hào)液）2滴，再分別加入待檢的血清樣本10ul，混勻。同時(shí)設(shè)陰性、陽(yáng)性及空白對(duì)照各一孔；陰性、陽(yáng)性對(duì)照不用再稀釋，直接加樣100ul即可，空白對(duì)照孔僅加入樣本稀釋液（5號(hào)液）2滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液（2號(hào)液）1滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。
加酶反應(yīng)：除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號(hào)液）2滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
顯色反應(yīng)：加底物（3號(hào)液）和顯色劑（4號(hào)液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號(hào)液）1滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）并判讀結(jié)果。

人生長(zhǎng)因子（HGH）ELISA Kit結(jié)果判斷

肉眼觀察：陰性對(duì)照接近無(wú)色，陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色，表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無(wú)色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽(yáng)性。
儀器判斷：以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長(zhǎng)）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽(yáng)性。當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.05時(shí)按0.05計(jì)算。

人生長(zhǎng)因子（HGH）ELISA Kit注意事項(xiàng)

試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
如陰陽(yáng)對(duì)照為凍干品時(shí)，請(qǐng)先按標(biāo)示加入蒸餾水溶解后使用。
洗滌時(shí)將蒸餾水加滿孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘，甩去孔內(nèi)液體。禁用自來(lái)水等其它水源。
為提高試驗(yàn)的可比性，建議使用儀器判讀結(jié)果。
如有條件，使用水浴箱孵育。

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