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原位雜交制片(滴片/涂片)
服務介紹:
采集的液體標本(如血液、菌液、細胞等)均勻的涂抹或滴在玻璃片上制成的標本,用于后期原位雜交及相關實驗室診斷等。
名稱 | 規格 |
原位雜交制片(滴片/涂片) | 張 |
實驗周期:
1個工作日。
實驗流程:
涂片制備:
1.取細胞懸液,2800r 4℃離心5min,棄上清液,根據底部沉淀的細胞量加入2mL原位雜交固定液(動物)固定。若肉眼看不見細胞沉淀時,用3000r/min,4℃離心10min。
2.取用固定液重懸的細胞懸液,2800r 25℃離心5min,棄上清液,根據底部沉淀加入PBS:
①若肉眼看不見細胞沉淀時,用3000r/min,25℃離心10min,依然無沉淀時,留取底部約0.2mL的液體,再加入0.5mL的PBS混勻后用移液槍吸取200μL,滴于提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓);
②若細胞沉淀量很少,綠豆大小時,棄上清,留取底部沉淀,加入0.5mL PBS,用移液槍吹打混勻后,吸取200μL,涂于提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓);
③若細胞沉淀量很多,黃豆大小或更大時,棄上清,留取底部沉淀,加入2mL PBS,用移液槍吹打混勻后,吸取150μL,涂于提前用組化筆畫好的大圓圈中(最-大長邊約5cm,最-大短邊約2cm的橢圓),在顯微鏡下觀察細胞量的多少,若還是過厚,再用PBS對倍稀釋該細胞懸液,直至在顯微鏡下觀察到細胞量涂布均勻。
3.用槍將細胞懸液鋪滿整個圓圈,涂片放置自然晾干。
送樣運輸要求:
4℃保存運輸
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