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植物過氧化物酶(POD)(檢測服務)
服務介紹:
植物過氧化物酶(POD)檢測試劑盒(愈創木酚微板法)檢測原理是以愈創木酚(又稱2-甲氧基酚)作為底物,在酶促反應的最適條件下采用每隔一定時間測定產物生成量的方法,于酶標儀470nm處測定吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內源性的過氧化物酶活性,尤其適用于測定水果中過氧化物酶活性。
背景介紹:
過氧化物酶(POD)是一種廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內的氧化酶,具有消除過氧化氫和酚類胺類毒性的雙重作用。
POD是植物在逆境條件下酶促防御系統的關鍵酶之一,與超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)協同作用,清除體內過剩的自由基,從而提高植物的抗逆性。
操作步驟(僅供參考):
1、 準備樣品:
①植物樣品:取0.5-1.0g植物組織或水果中層果肉加入4ml預冷的POD Lysis Buffer研磨或勻漿,4℃ 10000g離心15~20min,留取上清液,即為POD粗提液
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于過氧化物酶的測定。
③細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要用POD Lysis Buffer進行適當勻漿,4℃ 10000g離心15~20min,留取上清液,即為POD粗提液,
④高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的過氧化物酶,可以使用POD Lysis Buffer進行恰當的稀釋。
2、 配制POD Assay Buffer工作液:取適量的POD氧化劑和POD Assay Buffer,按POD氧化劑:POD Assay Buffer=1:14混合,
3、 POD加樣:取96孔板,按照下表設置對照孔孔、測定孔,注意:對照孔、測定孔中為同一待測樣品,但對照孔中是提前加熱煮沸5min的樣品
加入物(μl) | 對照孔 | 測定孔 |
待測樣品 | 5(提前煮沸5min) | 5 |
POD Lysis Buffer | 145 | 145 |
POD Assay Buffer工作液 | 100 | 100 |
4、 POD測定:立即以酶標儀,以對照孔為對照,測定470nm處測定孔的吸光度(A測定0);37℃準確孵育3min后,立即加入5μl POD終止液終止反應(備選方案),以對照孔為對照,以酶標儀測定470nm處測定孔的吸光度(A測定1)。
實驗結果:
全自動生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發送。
送樣須知:
1.南京和上海地區的客戶可提供上門取樣服務,提前一天聯系
2.外地客戶可郵寄樣本,樣本運輸應符合一般的生物學要求,密封加冰袋或者干冰運輸
3.若細胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性,請務必提前告知
4.測試結束提供實驗報告后,樣本可以保留1個月,若需保留樣本或者回收樣本請提前告知。
備注:本公司對客戶的項目的專有技術和資料(包括實驗方案,測試結果,樣本等)負有絕對保密的責任。
僅供科研實驗用,不做其他用途!
植物過氧化物酶(POD)(檢測服務)
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