2022年7月20日，《Nature》期刊同時刊登四篇文章，均使用到了Incucyte® 實時活細胞分析系統。
而在今年10月，這一成就再次上演，《Nature》期刊又同時刊登了三篇使用Incucyte® 的文章。這又一次證明Incucyte® 以其簡單的實驗設置和分析流程、可直接放置在培養箱中進行拍攝的設計、以及精準計算各種細胞指標的能力，深受眾多用戶的青睞，在體外細胞水平的實驗中有著廣泛應用。
這三篇《Nature》文章均引起了不小轟動，它們又是如何應用Incucyte® 的呢？
不可成藥靶點的抑制劑！[1]
艾伯維聯合開發了一種PTPN2/PTPN1抑制劑口服藥，其相關實驗結果已發布于頂級學術期刊《Nature》中。蛋白酪氨酸磷酸酶PTPN2和PTPN1是炎癥的中樞調節因子。然而，磷酸酶是具有挑戰性的藥物靶點，被認為是無法成藥的。艾伯維聯合開發了一款潛在“first-in-class”的口服PTPN2/PTPN1抑制劑ABBV-CLS-484（AC484），在PD-1阻斷耐藥的小鼠模型中引發強大的抗腫瘤免疫反應。該抑制劑目前已進入Ⅰ期臨床試驗。研究人員表示：ABBV-CLS-484是首個進入癌癥免疫療法臨床評估的活性位點磷酸酶抑制劑，并可能為針對這類重要酶的其他治療方法鋪平道路。
在研發實驗中，Incucyte® 實時活細胞分析儀也是大顯身手，在體外細胞實驗和共培養殺傷實驗均有廣泛應用。
圖1. a) 添加或不添加IFNγ(10 ng/ml)的AC484對B16腫瘤細胞生長抑制的百分比；
b) AC484 (1µM) 和IFNγ (10 ng/mL) 對WT和PTPN2/N1缺失B16細胞體外生長曲線的影響。作者比較了PTPN2/N1抑制對基因缺失的影響，發現AC484在體外劑量依賴性地增強了IFNγ驅動的生長停滯，與PTPN2/N1缺失的B16腫瘤細胞類似。
輕輕松松做細胞動力學增殖曲線，拍攝頻率隨心所欲，想幾分鐘拍一次都行！
異種器官移植不是夢![2]
生物科技公司eGenesis在頂尖雜志《Nature》發布了一項突破性的研究成果，該研究顯示：接收其所開發人源化豬腎移植后的食蟹猴存活超過2年！用于食蟹猴（OWM的一種）移植的豬腎總共經過69處基因組編輯，包含敲除了被認為會引起免疫排斥的三個聚糖抗原（3KO），過表達7種人類轉基因（7TG）以減少靈長類免疫系統的排斥反應，同時讓豬逆轉錄病毒基因的所有拷貝失活（RI）。實驗結果發現，攜帶人類轉基因的供體腎臟移植到食蟹猴中后可顯著延長存活時間。與接受僅敲除三聚糖抗原豬腎的對照組（3KO±RI）相比，那些接受含有敲除和人類轉基因豬腎移植的食蟹猴（3KO.7TG±RI）存活時間延長了七倍多——兩組的中位存活時間分別為24天和176天。在同時接受臨床相關免疫移植方案、屬于3KO.7TG±RI組中的一只食蟹猴，存活時間甚至超過2年（758天）。
在進行體外功能分析補體依賴性細胞毒性試驗實驗中，作者使用Incucyte® 實時活細胞分析系統和軟件計算Cytotox Red陽性細胞的數量。補體依賴細胞毒性是通過將Cytotox Red陽性細胞的數量歸一化到細胞總數來計算的。
圖2. 當與人或食蟹猴血清孵育45分鐘時，WT內皮細胞被溶解，而3KO（橙色組）修飾幾乎完全消除了人血清的補體依賴性細胞毒性，但沒有消除食蟹猴血清，說明食蟹猴血清具有較強的抗豬細胞毒活性；當孵育時間延長至15h時，3KO修飾不足以完全保護細胞，即細胞被人血清殺死；3KO.7TG±RI（藍色組）對人和食蟹猴血清細胞毒性均有保護作用，超過3KO的保護作用。
即便是采用終點法，Incucyte® 強大的分析軟件同樣能夠大顯身手，其生成的圖片作為原始數據，清晰度完全足夠。
潛在延緩衰老的機制![3]
Tait團隊和Passos團隊在頂級期刊《Nature》上發表了一項重磅研究成果，他們的研究發現線粒體外膜通透（MOMP）在細胞衰老時出現，并通過mtDNA激活cGAS-STING通路驅動了SASP(一種衰老相關的分泌表型)的產生。這一發現為細胞凋亡和衰老之間的聯系提供了新的理解，并展示了潛在的延緩衰老策略。
研究人員發現，在衰老細胞中，多數線粒體處于過度融合的狀態，只有少量線粒體發生破裂，產生miMOMP現象。miMOMP足以通過BAX/BAK的活化促使細胞質中出現更高的線粒體DNA分泌量，后者激活SASP的主要調控通路cGAS-STING，最終驅動SASP的發生。因此，研究人員嘗試使用了小分子BAX抑制劑BAI1處理衰老細胞，以便抑制miMOMP，結果顯示不僅在體外細胞實驗中能夠有效避免線粒體滲漏和SASP分子釋放，在動物實驗中，還讓老年小鼠變得更年輕。在細胞實驗中，研究人員使用Incucyte® 系統上使用細胞死活綠色熒光染料檢測了不同條件下細胞死亡情況。
圖3. BAI1處理在BAK敲除的細胞中BH-3模擬誘導的細胞死亡有保護作用，但在BAX敲除的細胞中沒有，這與BAX特異性抑制作用一致（a）；用BAI1處理的衰老細胞也更能抵抗ABT263誘導的細胞死亡（g）。
即使實驗組數量眾多，也不成問題；6個板位兼容各種孔板，輕松搞定各種實驗需求。
總而言之，上述研究體現出Incucyte® 實時活細胞成像分析系統的獨特優勢：
自動檢測，提升實驗效率
滿足密集時間點以及長時間監測的需求，一次實驗得到大量數據，解放人力，是從事細胞研究不可或缺的工具；
分析簡便，提升數據質量
軟件采集及分析模塊配合熒光檢測試劑，得到高度可靠的數據。實時檢測整個細胞死亡/凋亡曲線，在細胞死亡狀況較為接近的情況下，仍然在大量數據的前提下得到確切的結論；
6板位設計，多實驗同步開展
內設6個板位，可以分別獨立設置檢測程序，滿足6組不同實驗或多人實驗同時檢測的需求。
還是那句話，只要放好您的細胞，其他的就交給Incucyte® 吧！
第6版活細胞分析手冊
點擊下載《第6版活細胞分析手冊》，了解人工智能在非標記活細胞成像和分析方面的力量如何推動研究向前發展，并推動更深入的發現。
-參考文獻-
[1] Baumgartner, C.K., Ebrahimi-Nik, H., Iracheta-Vellve, A. et al. The PTPN2/PTPN1 inhibitor ABBV-CLS-484 unleashes potent anti-tumour immunity. Nature 622, 850–862 (2023).
[2] Anand, R.P., Layer, J.V., Heja, D. et al. Design and testing of a humanized porcine donor for xenotransplantation. Nature 622, 393–401 (2023)
[3] Victorelli, S., Salmonowicz, H., Chapman, J. et al. Apoptotic stress causes mtDNA release during senescence and drives the SASP. Nature 622, 627–636 (2023)
21
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務