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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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GMyc-PCR支原體檢測(cè)試劑盒
GMyc-PCR支原體檢測(cè)試劑盒

地:Genomeditech

貨物所在地:上海上海市

更新時(shí)間:2024/9/1 21:01:14

訪問次數(shù):515

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真:
86-21-34615995
址:
上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
網(wǎng)址:
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供應(yīng)簡(jiǎn)介
GMyc-PCR支原體檢測(cè)試劑盒主要采用PCR方法對(duì)各種生物材料(如細(xì)胞培養(yǎng)物、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分泌物、動(dòng)物血清等) 支原體感染的檢測(cè)。它綜合了幾個(gè)優(yōu)勢(shì):靈敏、特異、快速并且可以用直接用細(xì)胞培養(yǎng)上清液檢測(cè)。


詳細(xì)介紹

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
GMyc-PCR支原體檢測(cè)試劑盒主要采用PCR方法對(duì)各種生物材料如細(xì)胞培養(yǎng)物、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分泌物、動(dòng)物血清等支原體感染的檢測(cè)。它綜合了幾個(gè)優(yōu)勢(shì):靈敏、特異、快速并且可以用直接用細(xì)胞培養(yǎng)上清液檢測(cè)。本制品通過PCR方法檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞等生物材料中的支原體,所用引物為根據(jù)支原體16S-23S rRNA序列保守區(qū)域設(shè)計(jì),只特異性擴(kuò)增支原體DNA,檢出靈敏度與特異性均較高。PCR擴(kuò)增及電泳分析只需數(shù)個(gè)小時(shí),操作方便簡(jiǎn)單。
產(chǎn)品組分及保存:
1.試劑盒包裝清單:

試劑名
保存條件
容量
貨號(hào)
GMyc-1st PCR Mix
-20
500µl
GM-83599-1
GMyc-1st PCR Mix
-20
1ml2×500µl
GM-83599-2

1:長(zhǎng)期不用時(shí),可-80冷凍保存。
2PCR反應(yīng)極其靈敏,為防止假陽(yáng)性,加樣時(shí),zui后加陽(yáng)性對(duì)照。
2.試劑盒以外自備實(shí)驗(yàn)儀器及試劑:

器材                                           
試劑
PCR
瓊脂糖
PCR反應(yīng)管
GelRedEB
電泳儀及水平電泳槽                              
去離子水或雙蒸水
離心機(jī)                                          
 
微量移液器及移液器吸頭
 

實(shí)驗(yàn)流程:
PCR反應(yīng)為巢式PCR,*輪PCR結(jié)束后,取其反應(yīng)產(chǎn)物為第二輪PCR模板。根據(jù)兩輪PCR產(chǎn)物電泳條帶之有無及片段大小來分析結(jié)果。貼壁細(xì)胞培養(yǎng)3-6天后,直接取其上清液進(jìn)行PCR反應(yīng)。為排除細(xì)胞培養(yǎng)基抑制PCR反應(yīng),陽(yáng)性對(duì)照中需加入等量的細(xì)胞上清液。懸浮細(xì)胞不能作為樣品直接檢測(cè),會(huì)干擾PCR反應(yīng),需提取DNA并進(jìn)行PCR
*輪PCR
1.充分融解Myco-1st PCR Mix,按下列表格配制反應(yīng)液:
試劑
實(shí)驗(yàn)組
陽(yáng)性對(duì)照
陰性對(duì)照
Myco-1st PCR Mix
46µl
46µl
46µl
樣品
ddH2O
4µl
4µl
 
4µl
Positive Control Template1
 
1µl
 
1:為防止Positive Control Template污染,請(qǐng)將實(shí)驗(yàn)組和陰性對(duì)照組加完以后,zui后再將
Positive Control Template加入陽(yáng)性對(duì)照組。
2.按下列條件進(jìn)行PCR反應(yīng):
 
94
3 min
 
94
30 s
30~35 cycles
55
2 min
72
1 min
72
10 min
 
第二輪PCR
1.   充分融化引物及PCR Mix,按下列表格配制反應(yīng)液:
試劑
實(shí)驗(yàn)組
陽(yáng)性對(duì)照
陰性對(duì)照
Myco-2nd PCR Mix
24µl
24µl
24µl
1st PCR反應(yīng)液
1µl
1µl
1µl
2.按下列條件進(jìn)行PCR反應(yīng)
94
3 min
 
94
30 s
30~35 cycles
55
2 min
72
1 min
72
10 min
 
反應(yīng)結(jié)束后,取10 μl PCR反應(yīng)液進(jìn)行1.5%瓊脂糖凝膠電泳,確認(rèn)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。
 
推薦使用頻率:
 
新細(xì)胞進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室
必檢
液氮保存前
必檢
定期常規(guī)
每月檢測(cè)一次
發(fā)現(xiàn)污染后
每周檢測(cè)一次
發(fā)現(xiàn)細(xì)胞異常
隨時(shí)檢測(cè)
注意事項(xiàng):
1. 使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說明書全文。
2. 操作時(shí)應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽(yáng)性;整個(gè)檢測(cè)過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。
3. 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時(shí)禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。
4. 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過多的二聚體。
5. 細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。
6. 為了您的健康,實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服和帶一次性手套。
訂購(gòu)信息

貨號(hào)
名稱
產(chǎn)地
規(guī)格
報(bào)價(jià)
*
GM-83599-1
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit
GMyc-PCR
支原體檢測(cè)試劑盒
Genomeditech
10 assays
1120
896
GM-83599-2
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit
GMyc-PCR
支原體檢測(cè)試劑盒
Genomeditech
20 assays
1764
1411

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