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REPOTMSP1慢病毒報(bào)告基因是吉滿生物自主研發(fā)的用于檢測(cè)SP1轉(zhuǎn)錄活性水平為目的的報(bào)告基因慢病毒顆粒。SP1（specificity protein 1）是一種富含谷氨酰胺的轉(zhuǎn)錄因子，它能和GC盒相結(jié)合影響轉(zhuǎn)錄。

詳細(xì)介紹

REPO^TMSP1慢病毒報(bào)告基因主要是檢測(cè)SP1在細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄活性、藥物研究以及基因過表達(dá)和RNAi的表型分析等。

pGMLVSP1-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒載體的多克隆位點(diǎn)插入了多個(gè)SP1結(jié)合位點(diǎn)，可以高靈敏度地檢測(cè)SP1的激活水平。采用慢病毒作為報(bào)告基因的優(yōu)點(diǎn)在于它能夠感染多種難感染的細(xì)胞，比如原代細(xì)胞，干細(xì)胞，神經(jīng)元細(xì)胞等。而且慢病毒能夠?qū)⑼庠椿虿迦爰?xì)胞基因組內(nèi)，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

質(zhì)粒圖譜：

質(zhì)粒元件信息：

5'LTR	1-635
PBS （primer binding site）	636-653
Ψ （packaging signal）	685-822
RRE （Rev-response element）	1303-1536
cPPT （central polypurine tract）	2028-2151
SP1 response element	2191-2238
Luciferase	2304-3956
P_PGK（phosphoglycerate kinase promoter）	3986-4494
Puro^r（puromycin resistance gene）	4515-5114
WPRE（woodchuck posttranscriptional regulatory element）	5128-5719
3'LTR	5922-6558
PUC origin of replication	7701-7028
Amp^r	8842-7846

包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
GM-022006	REPO^TMSP1慢病毒報(bào)告基因	50ul×4管；1×10e7TU/ml
-	說明書	-

使用說明：

SP1報(bào)告基因慢病毒顆粒采用慢病毒轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞。用熒光素酶檢測(cè)試劑盒或雙熒光素酶檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

SP1的激活劑，可作為SP1報(bào)告基因的陽性對(duì)照。

注意事項(xiàng)：

1. 病毒操作時(shí)使用生物安全柜，如使用普通超凈工作臺(tái)操作病毒，請(qǐng)不要打開風(fēng)機(jī)。

2. 病毒操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時(shí)必須特別小心，不要產(chǎn)生氣霧或飛濺。如操作時(shí)超凈臺(tái)有病毒污染，立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養(yǎng)板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細(xì)胞感染情況時(shí)應(yīng)遵從以下步驟：擰緊培養(yǎng)瓶或蓋緊培養(yǎng)板。用70%乙醇清理培養(yǎng)瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗(yàn)臺(tái)前，用70%乙醇清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)。

5. 病毒操作完成后，用肥皂清洗雙手。

保存條件：

-80℃保存。（如保存時(shí)間過長(zhǎng)，使用前請(qǐng)重新檢測(cè)病毒滴度）

參考文獻(xiàn)：

[1]Abe K, Kumagai T, Takahashi C, Kezuka A, Murakami Y, Osawa Y, Motoki H, Matsuo T, Horiuchi M, Sode K, Igimi S, Ikebukuro K.

Detection of pathogenic bacteria by using zinc finger protein fused with firefly luciferase.

Anal Chem. 2012 Sep 18;84（18）:8028-32. doi: 10.1021/ac3018845. Epub 2012 Aug 24.

[2] Abe K, Kumagai T, Takahashi C, Kezuka A, Murakami Y, Osawa Y, Motoki H, Matsuo T, Horiuchi M, Sode K, Igimi S, Ikebukuro K.

Detection of pathogenic bacteria by using zinc finger protein fused with firefly luciferase.

Anal Chem. 2012 Sep 18;84（18）:8028-32. doi: 10.1021/ac3018845. Epub 2012 Aug 24.

[3] Ikuta K, Waguri-Nagaya Y, Kikuchi K, Yamagami T, Nozaki M, Aoyama M, Asai K, Otsuka T.

The Sp1 transcription factor is essential for the expression of gliostatin/thymidine phosphorylase in rheumatoid fibroblast-like synoviocytes.

Arthritis Res Ther. 2012 Apr 25;14（2）:R87. doi: 10.1186/ar3811.

[4] Yang PM, Lin PJ, Chen CC.

CD1d induction in solid tumor cells by histone deacetylase inhibitors through inhibition of HDAC1/2 and activation of Sp1.

Epigenetics. 2012 Apr;7（4）:390-9. doi: 10.4161/epi.19373. Epub 2012 Apr 1.

產(chǎn)品價(jià)格：

貨號(hào)	名稱	產(chǎn)地	規(guī)格	報(bào)價(jià)/元
GM-022006	Lentivirus SP1 luciferase reporter 慢病毒報(bào)告基因顆粒	Genomeditech	50ul×4管； 1×10e7TU/ml	3200

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