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Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制劑
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制劑 | 10603ES05 | 2KU | -20 ºC | 216.00 |
Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制劑 | 10603ES10 | 10KU | -20 ºC | 916.00 |
Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制劑 | 10603ES20 | 20KU | -20 ºC | 1695.00 |
Murine RNase inhibitor(40U/µl) 鼠源RNase抑制劑 | 10603ES60 | 100KU | -20 ºC | 11865.00 |
產品描述
RNase抑制劑（RNase inhibitor）是人的胎盤中存在的一種特異性核糖核酸酶(RNase)抑制劑，能夠特異地與RNase以非共價鍵結合形成復合體從而使RNase失活。本產品是以可溶形式在大腸桿菌中表達純化的重組鼠源RNase抑制劑，能夠廣泛抑制各種RNase (RNase A, B, C)，此外經過RT-PCR、RT-qPCR檢驗，本品能與HieffTM Reverse Transcriptase、M-MLV (H-) Reverse Transcriptase以及各種DNA Polymerase兼容。與人源RNase inhibitor相比，本品不含人源蛋白中的兩個對氧化非常敏感的半胱氨酸，因而具有更高的抗氧化活性，且更加適合于對高DTT敏感性實驗 (如qPCR)。
可用于cDNA*鏈合成、多核糖體的分離(Polysome isolation)、體外轉錄和體外無細胞翻譯系統。
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。產品-20 ºC保存。有效期2年。
活性定義
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為1個活性單位 (U)。RNase A 的活性通過水解Cyclic 2', 3'-CMP 生成3'-CMP定量求得。
質量控制
核酸外切酶殘留檢測：200 U本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反應1小時，DNA的電泳譜帶不發生變化。
核酸內切酶殘留檢測：200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反應1小時，DNA的電泳譜帶不發生變化。
大腸桿菌殘留DNA殘留檢測：50 μl體系中，加入200 U本品，以ddH2O為模板，擴增E. coli 16 s rDNA基因。35個循環后進行1%瓊脂糖凝膠電泳，EB染色，無擴增條帶。
應用實例
1. 在RNase free離心管中配制如下混合液：
RNase free ddH2O | to 20 μl |
5 × HieffTM Buffer | 4 μl |
Oligo (dT)18 (50 μM) | 1 μl |
dNTP Mix (10 mM each) | 1 μl |
RNase Inhibitor (40 U/μl) | 1 μl |
HieffTM Reverse Transcriptase (200 U/μl) | 1 μl |
模板RNA | 10 pg-2.5 μg |
2. 輕輕混勻。
3. 50 °C 45min, 70 °C 15 min。
4. 產物于-20℃保存。
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2）抑制RNase活性的pH值范圍較廣，在 pH 7～8時表現zui大活性。
3）起泡或劇烈攪拌 (Vortex等)會引起失活。
4）不抑制RNase H活性。
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