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產品簡介
| 供貨周期 | 兩周 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
|---|
產品介紹
Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina®是針對Illumina®高通量測序平臺研發的用于Multi-CUT&Tag實驗的文庫構建試劑盒，適用于100-100,000個細胞起始量的樣本建庫。Multi-CUT&Tag是研究蛋白與DNA互作的技術，相較于傳統的CUT&Tag，該技術使用nanobody-Tn5（Anti-mouse Tn5和Anti-rabbit Tn5），可實現一份細胞，兩種靶標的研究，同時，該技術實驗中無需再添加二抗。該技術具有一抗抗體投入量更少、無需二抗、文庫產量更高等優點。經過細胞捕獲、一抗孵育、轉座酶孵育、轉座酶激活、摻入DNA標準品、細胞裂解、磁珠回收gDNA、文庫擴增和磁珠分選等步驟，靶蛋白結合的DNA片段最終轉化為適用于Illumina®平臺測序的文庫。
本試劑盒包含兩個獨立模塊：BOX-I和BOX-II。BOX-I的核心為結合細胞的ConA磁珠和回收DNA的磁珠，BOX-II包含細胞透化劑、蛋白酶抑制劑、抗體結合buffer、轉座酶結合buffer、蛋白酶K以及后續文庫擴增所需的所有試劑。此外，本試劑盒已在不同種類細胞（如293T、K562、CHO、ESC細胞等）和動物組織（腦組織、肝臟、脾等）中進行了驗證，均具有良好的建庫效率和建庫產量。本試劑盒提供的所有試劑都經過嚴格的質量控制和功能驗證，上保證了文庫的穩定性和重復性。
組分信息
組分編號 | 組分名稱 | 12592ES04 | 12592ES12 | 12592ES48 | |
BOX-I | 12592-A | ConA Beads | 40 μL | 120 μL | 480 μL |
12592-B | DNA Selection Beads | 840 μL | 2.52 mL | 10.08 mL | |
12592-C | Cell wash buffer | 3.6 mL | 10.8 mL | 43.2 mL | |
12592-D | ConA bind buffer | 400 μL | 1.2 mL | 4.8 mL | |
BOX-II | 12592-E | Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-free) | 40 μL | 120 μL | 480 μL |
12592-F | 5% Digitonin | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-G | 3 M NaCl | 120 μL | 360 μL | 1440 μL | |
12592-H | 50x Protein blocker | 4 μL | 12 μL | 48 μL | |
12592-I | Anti-mouse Tn5 | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-J | Anti-rabbit Tn5 | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-K | 30x Activating buffer | 4 μL | 12 μL | 48 μL | |
12592-L | 15x Terminate Solution | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-M | DNA Spike-in mix V2 (5 pg/uL) | 4 μL | 12 μL | 48 μL | |
12592-N | 30x Proteinase K | 4 μL | 12 μL | 48 μL | |
12592-O | 2×Ultima Amplification Mix | 100 μL | 300 μL | 1.2 mL | |
12592-P | i5 Universal Primer | 8 μL | * | * | |
12592-Q | i7 Index Primer (T701) | 8 μL | * | * | |
【注】：*12592ES12/48試劑盒不含Index Primer，需搭配Cat#12417進行完整建庫；
*12592ES04中，index信息為i5 index GCCTTATG（對應mouse來源抗體數據）、AGGATATG（對應rabbit來源抗體數據）、i7 index TAAGGCGA（不同測序平臺，i5端對應的序列可能需要反向，具體見參考第六部分：文庫結構）。
儲存條件
BOX-I：2~8℃保存，BOX-II：-25~-15℃保存，有效期1年。
