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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業,制藥 |
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產品簡介
IL-1又稱為淋巴細胞刺激因子,細胞來源主要由活化的單核-巨噬細胞產生,主要存在形式為IL-1α和IL-1β,在體內發揮免疫調節作用。IL-1β作為IL-1家族主要成員,也主要由活化的巨噬細胞產生,并通過誘導IL-2釋放、促進B細胞成熟與增殖以及成纖維細胞生長因子激活來刺激胸腺細胞增殖,也可刺激滑膜細胞釋放前列腺素及各種膠原酶。IL-1β在免疫和炎癥反應、骨重塑、發熱、碳水化合物代謝等生理現象起著核心作用。異常的IL-1β信號通過促進上皮向間充質轉化、增加炎性細胞因子和趨化因子的產生、誘導免疫抑制和細胞凋亡抵抗以及增加白細胞粘附來驅動腫瘤發生。IL-1β導致炎癥的發生疾病包括糖尿病、關節炎和動脈粥樣硬化,此外IL-1β的異常激活也與大多數癌癥類型的不良預后有關,包括結腸癌、肺癌和乳腺癌等。
翌圣Human IL-1β/IL-1F2 ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿和細胞培養上清中的人白介素1β(Human IL-1β/IL-1F2)。特異性抗人白介素1β抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經過孵育,樣本中存在的人白介素1β與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入檢測抗體孵育結合,經洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人白介素1β的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
貨號 | 97028ES48 / 97028ES96 |
規格 | 48 T / 96 T |
檢測范圍 | 3.9-250 pg/mL |
檢測方法 | 雙抗夾心法 |
檢測時長 | 4.5小時 |
靈敏度 | 1.0 pg/mL |
稀釋線性 | 81 - 120% |
回收率 | 79 - 107% |
板內差 | 5.4% |
板間差 | 9.6% |
實驗數據
標曲數據
數據擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數據分析。
濃度(pg/mL) | 顯色值 | 平均值 | 校準值 | |
250 | 2.716 | 2.640 | 2.678 | 2.681 |
125 | 1.680 | 1.662 | 1.671 | 1.658 |
62.5 | 0.885 | 0.902 | 0.893 | 0.918 |
31.25 | 0.505 | 0.504 | 0.504 | 0.492 |
15.63 | 0.290 | 0.293 | 0.291 | 0.277 |
7.81 | 0.171 | 0.179 | 0.175 | 0.176 |
3.90 | 0.119 | 0.120 | 0.120 | 0.130 |
0 | 0.067 | 0.065 | 0.066 | / |
標準曲線圖
靈敏度檢測
IL-1β的 檢測限為1.0 pg/mL,通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定8次,評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測24次,評估酶標板間的精密度。
項目 | 板內精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
10 | 10 | 10 | 24 | 24 | 24 | |
平均值 | 114.8 | 28.0 | 6.0 | 116.6 | 28.6 | 6.3 |
標準差 | 3.6 | 1.3 | 0.5 | 4.1 | 1.2 | 0.6 |
變異系數(%) | 3.1 | 4.5 | 8.7 | 3.6 | 4.2 | 9.0 |
回收率檢測
通過不同水平的IL-1β添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍(%) |
血清 | 98.2 | 81.8-107.4 |
血漿 | 90.8 | 79.1-104.5 |
細胞培養上清 | 86.4 | 78.6-94.6 |
稀釋線性檢測
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 100.0 | 97.7-102.8 |
1:04 | 106.4 | 100.5-112.8 |
1:08 | 108.1 | 103.0-112.8 |
1:16 | 112.8 | 105.7-120.0 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 99.8 | 99.2-100.4 |
1:04 | 102.3 | 100.5-104.1 |
1:08 | 105.3 | 103.0-107.6 |
1:16 | 108.5 | 105.7-111.4 |
細胞培養上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 84.9 | 81.3-87.5 |
1:04 | 86.3 | 82.0-89.6 |
1:08 | 89.0 | 87.4-91.4 |
1:16 | 88.4 | 84.8-91.8 |
樣本值
應用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數目 | 平均值(pg/mL) | 樣本值(pg/mL) |
血清 | 10 | 3.8 | n.d. -22.4 |
血漿 | 6 | 58.1 | n.d. -159.8 |
細胞培養上清 | 4 | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得1 ng/mL
測定特異性
本試劑盒識別天然和重組人IL-1β,沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant Human: | Recombinant Mouse: | |
IFN-γ | IL-18 | IFN-γ |
IL-1α | IL-21 | IL-1α |
IL-1ra | IL-23 | IL-1β |
IL-2 | IL-33 | IL-2 |
IL-4 | IL-38 | IL-4 |
IL-5 | ST2 | IL-6 |
IL-6 | TNF-α | IL-10 |
IL-8 | VEGF | IL-33 |
IL-10 | ST2 | |
IL-12 | TNF-α
|
檢測簡圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標曲不好 | 移液量不準確 | 檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 | ||
顯色值偏低 | 孵育時間太短 | 給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 | 校準移液器和規范操作 | |
CV偏高 | 酶標板清洗不當 | 使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲存不當 | 按照產品組分表進行保存。 |