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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,制藥 |
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產品簡介
2×Hieff® PCR Master Mix是即用型的常規PCR預混合溶液,含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及優化的緩沖體系。反應時只需加入引物和模板即可進行擴增,大大簡化實驗的操作步驟。本產品中含有優良的穩定劑,在4℃條件下以放置3個月。PCR產物具有3’-dA突出端,可輕松克隆至T載體。
儲存條件
-25~-15℃保存,有效期2年。
使用說明
組分 | 體積 (μL) | 循環步驟 | 溫度 (°C) | 時間 | 循環數 | |
模板DNA | 適量 | 預變性 | 94 | 5 min | 1 | |
Primer 1 (10 μM) | 2 | 變性 | 94 | 30 sec | 35 | |
Primer 2 (10 μM) | 2 | 退火 | 50-60 | 30 sec | ||
2×Hieff® PCR Master Mix | 25 | 延伸 | 72 | 30 sec/kb | ||
ddH2O | to 50 | 終延伸 | 72 | 10 min | 1 | |
表1 擴增體系(50 μL) | 表2 擴增條件 |
【注】:使用前請務必將其混勻。
1)模板使用量:基因組DNA:50-200 ng;質粒DNA:0.1-10 ng。
2)Mg2+濃度:本產品中含有3 mM的MgCl2,適合大部分PCR反應。
3)退火溫度:請參考引物的理論Tm值,退火溫度可設置低于引物理論值2-5℃。
4)延伸時間:分子鑒定建議30 sec/kb。基因克隆建議60 sec/kb,以保證產物量達到最高。
注意事項
1.本產品PCR產物不適用于聚丙烯酰胺凝膠電泳。
2.為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
3.本產品僅作科研用途!
應用實例
圖1:2×Hieff® PCR Master Mix擴增1.2 kb片段。產品分別在-20℃放置1年,4℃放置3個月,25℃放置1個月后均可有效擴增目的片段。模板:擬南芥基因組;退火溫度:60℃;延伸時間:40 sec。