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參考價: | 面議 |
- 41206ES30 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):311更新時間:2022-01-28 14:02:46
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 30 T |
---|---|---|---|
貨號 | 41206ES30 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Serum/Plasma) 血清/血漿外泌體快速抽提試劑盒Plus | 41206ES30 | 30 T | 3155.00 |
產(chǎn)品描述
Exosome(外泌體)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu),存在于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中。Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息,不僅在細胞與細胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。
本試劑盒采用*的分離技術(shù),可以快速從血清/血漿中獲得大量完整的外泌體顆粒,適用于下游的細胞共培養(yǎng)、電鏡分析、Western Blot、熒光定量(qPCR)和高通量測序等應用。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
41206ES30 | ||
41206-A | Exosome isolation solution(Serum/Plasma) | 30 mL |
41206-B | Exosome Purification Column | 30個 |
運輸和保存方法
室溫運輸,本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個月。
注意事項
使用前請將外泌體抽提試劑(41206-A)充分混勻。
2、產(chǎn)品只針對血清/血漿樣本,不適用其它體液或者是細胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提;如果需要進行細胞上清外泌體分離,
請選用細胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒。
3、如果想要進一步純化外泌體,可以使用相應抗體包被的磁珠進行親和純化。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5、本產(chǎn)品僅作科研用途!
操作方法
樣品預處理:
收集新鮮的樣品,置于冰上待用;若為凍存的樣品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍,待*融化后置于冰上待用。
取1 mL血清/血液樣品轉(zhuǎn)移至離心管中,4℃,3000×g離心10 min,棄沉淀,并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
3、將轉(zhuǎn)移的上清,4℃,10,000×g離心20 min,棄沉淀,將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
外泌體分離:
1、向預處理后的樣品中,加入4倍體積的1×PBS充分混勻。
Serum/Plasma+PBS | 41206-A試劑用量 |
200 μL+800 μL | 200 μL |
1.0 mL+4.0 mL | 1.0 mL |
2、在PBS稀釋后的樣品中,繼續(xù)加入相應量的41206-A試劑;蓋緊離心管蓋,渦旋振蕩1 min,放置于4℃冰箱靜置2 h。3、取出裝有混合液的離心管,4℃,10,000×g離心60 min,棄上清(盡可能吸凈上清液),收集富含外泌體的沉淀。
4、吸取一定量體積的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物,待其充分懸浮于PBS后,將懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中。
【注】加入PBS的量,建議根據(jù)初始樣本的體積決定,初始樣本體積:1×PBS體積=2.5:1。
5、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃,12,000×g離心2 min,棄沉淀,保留上清液,該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。
【注】此時如果依然可以看到明顯的沉淀,建議重復步驟4,重新進行洗滌和沉淀。
外泌體純化
1)純化外泌體:將收獲的外泌體顆粒粗制品轉(zhuǎn)入Exosome Purification Column (EP柱)上管中,于4℃,3000g離心10 min,收集管底的液體,即為純化后的外泌體顆粒。
2)外泌體的保存:純化后的外泌體可于4℃保存3天,分裝后于-80℃ 長期保存,避免反復凍融。
外泌體除菌(可選):
獲得的外泌體后期需要與細胞共培養(yǎng),可以使用0.22 μm的濾器進行過濾除菌。初次嘗試時,外泌體濃度在10-100 μg/mL內(nèi)做梯度摸索,選擇一個較為合適的條件。
HB220107