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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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您現(xiàn)在的位置: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司>>分子生物學>>內(nèi)切酶>> 15005ES50FuniCut™ BsaI
15005ES50FuniCut™ BsaI
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 15005ES50 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):296更新時間:2023-07-20 23:58:21

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 15005ES50 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
FuniCut™系列內(nèi)切酶是通過基因工程重組技術,可在5~15 min內(nèi)精確完成DNA切割的快速限制性內(nèi)切酶,適用于快速切割質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA等。FuniCut™系列快速內(nèi)切酶共用一種酶切緩沖液,從而簡化了酶切反應體系,另外,有良好的酶活冗余度,可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。
產(chǎn)品介紹

酶切點位

5'-GGTCTC(N)1-3'

3'-CCAGAG(N)5-5'

 

產(chǎn)品簡介

 

FuniCut™系列內(nèi)切酶是通過基因工程重組技術,可在515 min內(nèi)精確完成DNA切割的快速限制性內(nèi)切酶,適用于快速切割質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA 等。FuniCut™系列快速內(nèi)切酶共用一種酶切緩沖液,從而簡化了酶切反應體系,另外,有良好的酶活冗余度,可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號

15005ES50

規(guī)格

50 T

識別位置

5'-GGTCTC(N)1↓-3'

3'-CCAGAG(N)5↑-5'

推薦反應條件

1×FuniCut™ 緩沖液;最適37孵育

酶活

20 U/μL

失活條件

80孵育20 min

 

組分信息

 

組分編號

組分名稱

15005ES50

15005-A

FuniCut™ BsaI

50 μL

15005-B

10×FuniCut™ Buffer

1 mL

15005-C

10×FuniCut™ Color Buffer*

1 mL

*10×FuniCut™ Color Buffer包括紅色和黃色示蹤染料,可將產(chǎn)物直接用于凝膠電泳。FuniCut™ Color Buffer的紅色染料與2500 bp雙鏈DNA片段在1%瓊脂糖凝膠中遷移速率接近;黃色染料與10 bp雙鏈DNA片段在1%瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。

 

儲存條件

 

-25~-15保存,有效期2年。

 

注意事項

 

1.3 h孵育未表現(xiàn)星號活性,延時酶切可能出現(xiàn)星號活性

2.受CpG甲基化影響,序列重疊,剪切阻斷。

3.受Dcm甲基化影響,序列重疊,剪切阻斷。

4.受EcoBI甲基化影響,序列重疊,剪切阻斷

5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作

6.本產(chǎn)品僅作科研用途

 

使用方法

 

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建議的加樣順序配制體系反應液(冰上操作)

組分

質(zhì)粒DNA

PCR產(chǎn)物

基因組DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL (~1 μg)

10 μL (~0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut™ BsaI

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本體系指已純化后的PCR產(chǎn)物。未純化的PCR產(chǎn)物具備一定的離子強度,10×FuniCutTM Buffer加入量可適當減少至2 μL。若下一步進行克隆等實驗,酶切前需純化PCR產(chǎn)物。

2) 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻(切勿渦旋),然后瞬時離心以收集掛壁液滴。

3) 37孵育15 min(質(zhì)粒),或15~30 min(PCR產(chǎn)物),或30~60 min(基因組DNA)。

4) 80孵育20 min 即可使酶失活,停止反應(可選)。

5) 如果使用FuniCut™ Color Buffer進行酶切反應,得到的產(chǎn)物可直接上樣電泳。

2. 雙酶切或多酶切

1) 每種內(nèi)切酶的用量為1 μL,并根據(jù)需要適當擴大反應體系。

2) 所有內(nèi)切酶的體積總和不得超過總反應體系的1/10。

3) 如果選用的幾種內(nèi)切酶的最適反應溫度不同,應先以最適溫度低的酶開始酶切,再添加最適溫度較高的酶,以較高的溫度進行孵育。

3. 質(zhì)粒的擴大反應體系

組分

體積(20 μL)

體積(20 μL)

體積(50 μL)*

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

FuniCut™ BsaI

1 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

*如果總反應體系大于20 μL,可使用水浴、金屬浴或沙浴,并增加孵育時間。

4. 不同DNA中的識別位點數(shù)

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

2

0

1

1

1

0

0

1

5. 甲基化修飾影響

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

無影響

序列重疊,剪切阻斷

序列重疊,剪切阻斷

無影響

序列重疊,剪切阻斷

6. 不同反應緩沖液中的活性*

反應緩沖液

FuniCut™ Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

100%

100%

100%

*活性數(shù)據(jù)來自翌圣生物限制酶標準反應體系下的檢測。

 

Ver.CN20230706



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