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供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 50 T |
---|---|---|---|
貨號 | 10170ES50 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè) |
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Animal Tissue PCR Component 動物組織PCR組分 | 10170ES50 | 50 T | 125.00 |
Animal Tissue PCR Component 動物組織PCR組分 | 10170ES70 | 200 T | 435.00 |
產品描述
本試劑盒中的2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)是即用型的PCR預混合溶液,含有熱啟動Taq DNA Polymerase,dNTP以及優(yōu)化的緩沖體系,只需加入引物和模板即可進行擴增,大大簡化了實驗的操作步驟,可以高通量操作并提高實驗結果的重現性。本試劑盒中的PCR Enhancer是一種由多種成分組成的混合添加劑,在PCR反應中,PCR Enhancer能夠有效降低高GC模板和具有復雜二級結構模板的解鏈溫度,極大地減少DNA二級結構對PCR的影響,增加PCR反應的靈敏度和特異性,且兼容幾乎所有DNA聚合酶的擴增體系。本試劑盒主要應用于動物基因型鑒定,建議搭配動物組織裂解組分(Cat NO.19698ES)一起使用,效果更佳。
產品組分
編號 | 組分 | 產品編號/規(guī)格 | |
10170ES50(50 T) | 10170ES70(200 T) | ||
10170-A | 2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye) | 500 μL | 2 ×1 mL |
10170-B | 5 × PCR Enhancer | 200 μL | 800 μL |
b)2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye) 包含 PCR 擴增所需要的熱啟動 Taq DNA 聚合酶、dNTP 和 Mg2+等;已混有溴酚藍染料作為電泳指示劑, PCR 產物可以直接進行電泳。
c)5 × PCR Enhancer :高GC含量擴增(如大于65%)時,建議使用5 × PCR Enhancer。
運輸與保存
冰袋運輸。-20℃保存,有效期1年。
PCR反應體系
組分 | 體積(μL) | 終濃度 |
2× Tissue Direct PCR Mix(With Dye) | 10 | 1 × |
Forward Primer(10 μM) | 0.5 | 0.25 μM |
Reverse Primer(10 μM) | 0.5 | 0.25 μM |
裂解產物(DNA模板) | 2 | - |
無菌超純水 | To 20 | - |
【注】:各組分使用前應充分混勻。
a)模板使用量:建議總體系的5-20%之間,避免超過總體系的20%。
b)引物終濃度:反應性能較差時,推薦在 0.1- 0.5 μM 范圍內調整引物濃度。
c)反應體系:推薦使用 20 μL,以保證目的基因擴增的有效性和重復性。
d)體系配制:配制好PCR反應體系,置于渦旋儀上渦旋混勻,瞬時離心將反應液集于管底。
e)對照反應:建議進行PCR時,設置陽性和陰性PCR對照反應以便于排除假陽性或假陰性的干擾。
PCR反應條件
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 35 |
退火* | 60℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 20 sec | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*退火溫度:請參考引物的理論 Tm 值,退火溫度可設置低于引物理論值5℃,或通過梯度 PCR 確定最佳溫度。
注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響 PCR 效率。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服、佩戴、眼罩、一次性手套等采取防護性措施進行實驗操作。
3. 本產品僅作科研用途!
HB210811