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供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 40113ES03 |
---|---|---|---|
應用領域 | 生物產業 |
Recombinant Human Fibronectin
重組人纖維連接蛋白
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格(元) |
Recombinant Human Fibronectin 重組人纖維連接蛋白 | 40113ES03 | 1 mg | 655.00 |
40113ES05 | 5 mg | 1855.00 | |
40113ES10 | 10 mg | 3355.00 |
產品描述
細胞纖連蛋白(fibronectin,FN)是一種細胞外糖蛋白,分別以可溶形式存在于體液中,或以不可溶形式存在于細胞外 基質中。作為主要的細胞粘附分子之一,FN在許多重要的生理過程中起著關鍵性作用,如胚胎生成,傷口愈合,止血和血 栓形成。纖連蛋白表達的改變,降解以及組合與大量的病理發生密切相關,包括癌癥和纖維化。
FN一般以二聚體形式分泌,各個單體的分子量為220-250 kDa。主要由成纖維細胞、內皮細胞、軟骨細胞、神經膠質細胞和肌細胞等合成,并分布在周圍。器///官移///植會激發一系列的免疫級聯反應,FN在T細胞活化過程表現為激活因子。所有FN由同一個基因編碼產生,因轉錄后的 mRNA 經組織特異性的不同切割方式生成不同的翻譯產物。FN上的多個結構域能 與膠原、纖維蛋白、肝素和特異性細胞膜受體結合。其中廣為人知的結合域是Arg-Gly-Asp序列(RGD),為整合素識別后 調控細胞粘附。FN參與體內眾多生理作用和功能,如各種細胞間的吸附和遷移,細胞骨架組裝,酪氨酸磷酸化和腫瘤轉移等。
纖連蛋白(FN)的應用:1)作為細胞培養基質;功能在于促進細胞生長,提高細胞貼壁率,增強細胞代謝水平,縮短
細胞生長時間;雜交瘤技術中提高細胞融合率等。2)疾病診斷和治療;功能在于傷口修復和愈合,癌癥診斷和治療,治療
血管系統和心腦血管疾病等。
目前Yeasen公司運用基因重組技術,生產的重組人纖維連接蛋白(Recombinant Human Fibronectin ,rFN),是以單體形式存在,分子量約為210 KDa。可作為一種細胞培養基質,替換Matrigel、鼠尾膠原、血源纖連蛋白等,提高細胞貼壁率,增強細胞代謝水平,縮短細胞生長周期。另外也可直接添加到培養基中,可替換或降低血清使用量,促進細胞貼壁、遷移、移動生長、維持細胞狀態。
本品以凍干粉形式供貨,已達到細胞培養級別,具有批次間差異小、無任何病毒感染等特點。
產品性質
CAS號(CAS Number) | 86088-83-7 |
外觀(Appearance) | 白色凍干粉 |
分子量(Molecular Weight) | 200~210 kDa |
酸堿度(pH) | 6.0~8.0 |
活性(Potency) | ≥27.5 USP U/mg |
純度(Purity ) | ≥95%(by SDS-PAGE) |
蛋白含量(Protein Content) | ≥1 mg |
內毒素(Endotoxin) | < 0.5 EU/μg |
溶解性(Solubility) | 1~5 mg/mL溶于1×PBS,pH 7.2~7.4緩沖溶液中。 |
運輸和保存方法
冰袋運輸。凍干粉-20 ℃保存,2年以上有效。儲存液-20 ℃保存,3~6個月有效。
【注】:建議用1×PBS溶解凍干粉,開封后盡快使用,避免反復凍融。
注意事項
1)干粉在凍干前,原液是過濾無菌的,建議用無菌的PBS溶解,不需要再過濾處理。
2)用1×PBS溶解凍干粉后,建議分裝保存,避免反復凍融。
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
母液配制
用1×PBS,pH 7.2~7.4溶解重組人纖維連接蛋白(rFN),建議配置1 mg/mL的儲存液。母液按照單次使用劑量,分裝凍存于-20 ℃,避免反復凍融。
使用方法(以6孔板為例,其他培養板加樣體積請參考表1)
1.包被/鋪板實驗
1)取出適量的重組人纖維連接蛋白(rFN),用無菌1×PBS,pH 7.2~7.4稀釋至工作液濃度,終濃度參考范圍50~100 μg/mL。混勻后,加入到6孔板中,800 μL/孔,保證工作液*覆蓋6孔板底部。
2)將加有rFN工作液的6孔板,放置在4 ℃過夜或者37 ℃包被1 h。
3)收集6孔板中的工作液,放置4 ℃保存,一周內可用于其他培養瓶/板包被。
4)取出rFN包被后的6孔板,加入正常的細胞培養基后,可直接接種細胞,促進細胞貼壁、生長等。
5)若包被后的6孔板暫不使用,放置在4 ℃密封保存,建議一周內使用完。
【注】:包被/鋪板實驗中,重組人纖維連接蛋白(rFN)工作液的加入量,應根據培養皿/瓶的大小進行調整,請參見下表1。
表1不同培養瓶/板包被時推薦 rFN加入量
培養皿 | 底面積 (cm2) | 推薦rFN工作液加入量 |
96孔板 | 0.32 | 50 μL |
24孔板 | 2 | 200 μL |
12孔板 | 4.5 | 400 μL |
6孔板 | 9.6 | 800 μL |
35 mm培養皿 | 8 | 600 μL |
60 mm培養皿 | 21 | 1.6 mL |
25 cm2培養瓶 | 25~28 | 2.0 mL |
2.細胞實驗
細胞培養過程中,將rFN直接加入細胞培養基中,可促進細胞貼壁、遷移、維持細胞狀態等。終濃度參考范圍5~50 μg/mL。
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HB200813