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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 11214ES60 | 應用領域 | 生物產業 |
| 主要用途 | 多重定量PCR反應 |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus) Hieff 多重定量PCR反應試劑盒(RT-qPCR) | 11214ES60 | 100 T | 3062.00 |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus) Hieff 多重定量PCR反應試劑盒(RT-qPCR) | 11214ES80 | 1000 T | 24062.00 |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus) Hieff 多重定量PCR反應試劑盒(RT-qPCR) | 11214ES92 | 10000 T | 185762.00 |
產品描述
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus)是以RNA為模板進行多重定量PCR反應的試劑盒。在實驗的過程中，逆轉錄和定量PCR在同一反應管中進行，簡化了實驗操作，本產品含有UDG酶，可有效防止氣溶膠污染的風險。
Hieff 多重定量PCR反應試劑盒(RT-qPCR)利用耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第—鏈cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase進行定量擴增。本試劑盒主要包含優化的MP Buffer，Enzymes Mix等，緩沖液中已含有Mg2+和dNTP等，并添加了有效抑制非特異性PCR擴增的因子和提升多重qPCR反應擴增效率的因子，能夠保證引物擴增效率的同時，進行多達四重的反應。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 | ||
11214ES60 (100 T) | 11214ES80 (1000 T) | 11214ES92 (10000 T) | ||
11214-A | 2×Hifair® VN MP Buffer | 1.25 mL | 12.5 mL | 125 mL |
11214-B | Hifair® VN Enzyme Mix (UDG plus) | 150 μL | 750 μL×2 | 15 mL |
11214-C | RNase Free H2O | 1.2 mL | 12 mL | 120 mL |
【注】1) 2×Hifair® VN MP Buffer為Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的簡寫。本組分含有dNTP和dUTP。
Hifair® VN Enzyme Mix主要包含有耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase和UDG酶。
適用機型
需添加High Rox適用機型： ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
需添加Low Rox 適用機型： ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
不需要Rox校正的儀器型號：
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
運輸與保存方式
冰袋運輸。-20℃保存，有效期1年。本品避免反復凍融。建議分裝保存。
注意事項
1. 實驗過程中請使用RNase free耗材。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
反應體系（以25 μL為例）
組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
2×Hifair® VN MP Buffer | 12.5 | 1× |
Hifair® VN Enzyme Mix (UDG plus) | 1.5 | - |
Primer/Probe Mix (10 μM) | 1-4 | 0.4 μM |
模板RNA | 1-5 | - |
RNase Free H2O | to 25 | - |
【注】：使用前務必充分混勻，避免劇烈震蕩產生過多氣泡。
a) 引物濃度：Primer Mix中包含多對引物，通常每條引物終濃度為0.4 μM，也可以根據情況在0.1-1.0 μM間進行調整。
b) 探針濃度：Probe Mix中包含多條不同熒光信號的探針，每條探針的濃度可根據具體情況在50-300 nM間調整。
c) 模板稀釋：qPCR靈敏度*，建議將模板進行稀釋使用，控制Ct值在20-35之間適宜。
d) 反應體系：推薦使用25 μL或50 μL，以保證目的基因擴增的有效性和重復性。
e) 體系配制：請于超凈工作臺內配制，并使用無核酸酶殘留的槍頭、反應管；推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
標準擴增程序
反應階段 | 溫度 | 時間 | 循環數 | |
1 | 逆轉錄 | 50℃a | 10 min | 1 |
2 | 預變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
3 | 擴增反應 | 95℃ | 15 sec | 45 |
60℃b | 30 secc |
【注】
a) 逆轉錄：42℃或者50℃均可，時間10-15 min。
b) 擴增反應：擴增反應溫度根據設計的引物Tm值進行調整。
c) 熒光信號采集：不同的qPCR檢測儀器所需的熒光信號采集時間不同，請根據短時間限制進行設置。
相關產品
產品名稱 | 貨號 | 規格 | 價格（元） |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 11213ES60/80/92 | 100/1000/10000T | 2782/ 21832/ 168882 |
HB200723
