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20614ES76紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 20614ES76 產(chǎn)品型號(hào)
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):653更新時(shí)間:2021-02-25 10:43:02

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 現(xiàn)貨 貨號(hào) 20614ES76
應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,簡(jiǎn)稱為LDL)是通過脂蛋白酯酶的水解作用,脫去極低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三脂,釋放游離脂肪酸轉(zhuǎn)化而來的。因甘油三酯的去除使得膽固醇所占比例提高,增加顆粒本身密度,從而得到LDL。
產(chǎn)品介紹

Human DiI-Low Density Lipoprotein (Human DiI-LDL)

紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

保存

價(jià)格(元)

Human DiI-Low Density Lipoprotein (Human DiI-LDL) 紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白

20614ES76

500µg

4ºC避光

2255.00

產(chǎn)品描述

低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,簡(jiǎn)稱為LDL)是通過脂蛋白酯酶的水解作用,脫去極低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三脂,釋放游離脂肪酸轉(zhuǎn)化而來的。因甘油三酯的去除使得膽固醇所占比例提高,增加顆粒本身密度,從而得到LDL。LDL與脊椎細(xì)胞表面的受體特異性結(jié)合,然后通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用將膽固醇運(yùn)輸?shù)饺砀魈幖?xì)胞。因此,LDL可以用來研究受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用過程,尤其是在動(dòng)脈粥樣硬化等疾病中,血漿來源的LDL還可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。

紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白(Human DiI-LDL)是標(biāo)記熒光探針Dil(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的LDL,可以用來觀察培養(yǎng)細(xì)胞的LDL結(jié)合位點(diǎn),或篩選LDL受體表達(dá)缺陷型細(xì)胞突變株。也可以通過流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估細(xì)胞受體水平,或檢測(cè)組織內(nèi)的受體水平。 DiI-LDL是研究細(xì)胞內(nèi)吞作用非常好的標(biāo)記物。

翊圣提供的Human DiI-LDL為無菌包裝,可以直接稀釋使用。除提供DiI-LDL,我們還提供不帶標(biāo)記的LDL,以及修飾化的LDL如乙酰化LDL(Ac-LDL),以及氧化修飾的LDL(Ox-LDL)。 

制備方法

純化的人健康血漿來源的LDL直接標(biāo)記上DiI熒光探針,然后通過超速離心以及透析的方法純化回收標(biāo)記產(chǎn)物,并濾膜過濾除菌。純化的DiI-LDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS,pH 7.4中。

產(chǎn)品性質(zhì)

濃度(Concentration)

0.8-3.0 mg/ml

外觀(Appearance)

乳狀液體

吸光度比例(Absorbance Ratio)

Dil/Protein=555nm/275nm=1.30

緩沖液組分(Buffer Components)

0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸;

4ºC無菌避光,收到貨后可穩(wěn)定保存6周。千萬不可凍存使用時(shí)一定要無菌操作!

注意事項(xiàng)

1)本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定,建議即配即用;

2)長期貯存可能會(huì)有沉淀析出,屬于正常現(xiàn)象,低速離心2 min去除沉淀即可使用;

3)LDL與LDL受體的結(jié)合需要Ca2+和Mn2+的參與,過量EDTA的存在會(huì)抑制其結(jié)合;

4)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操

 

操作步驟

1)工作液制備:無菌條件下,將DiI-LDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至20-40 µg/ml。

2)細(xì)胞準(zhǔn)備:吸除培養(yǎng)板內(nèi)培養(yǎng)基,向活細(xì)胞內(nèi)加入上述LDL,37℃培養(yǎng)4-5小時(shí)。

3)孵育結(jié)束,吸去含有Human DiI-Ox-LDL的培養(yǎng)基,并用無探針的培養(yǎng)基洗幾次。

4)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

a)熒光顯微鏡觀察

采用標(biāo)準(zhǔn)的羅丹明激發(fā):發(fā)射濾光片(或建議使用波長為:Ex/Em=549nm/565nm);若需要請(qǐng)使用含3%甲醛的PBS進(jìn)行固定,切勿使用甲醇或丙酮固定,因Dil易溶于有機(jī)溶劑。需設(shè)陽性細(xì)胞以做對(duì)照。

b)細(xì)胞分選(流式細(xì)胞術(shù))

胰蛋白酶處理細(xì)胞或者加入EDTA制成單細(xì)胞懸液,選用合適的已標(biāo)記純化細(xì)胞用作陰性和陽性對(duì)照,從而進(jìn)行流式分選設(shè)門(gate)。(建議使用波長為Ex: 488/514/549nm; Em: 565nm)。

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