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供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 10733ES03 |
---|---|---|---|
應用領域 | 生物產業 |
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格(元) |
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (No Dye) | 10733ES03 | 1 mL | 96.00 |
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (No Dye) | 10733ES08 | 5×1 mL | 432.00 |
產品描述
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (No Dye)是即用型的PCR預混合溶液,含有Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase,dNTP以及優化的緩沖體系,只需加入引物和模板即可進行擴增,大大簡化了實驗的操作步驟,可以高通量操作并提高實驗結果的重現性。Hieff UNICON® HotStart DNA Polymerase 的激活時間只需要2-3 min,兼容現有的 PCR 程序。本產品防止了在樣品準備階段產生非特異擴增,可以有效地進行基因克隆和分型實驗。PCR產物具有3’-dA突出端,可輕松克隆至T載體。預混液中不含染料。
產品應用
低拷貝基因擴增、基因型鑒定、菌落PCR
運輸與保存方法
冰袋運輸。-20℃保存,有效期2年。
注意事項
1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
2)本產品僅作科研用途!
PCR反應體系(50 μL)
組分 | 體積 | 終濃度 |
ddH2O | to 50 μL | - |
模板DNA | 適量 | - |
Primer正向 (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
Primer反向 (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix(No Dye) | 25 μL | 1× |
【注】:針對不同模板的最佳反應濃度有所不同,下表為50 μL反應體系推薦模板使用量,僅供參考。
模板種類 | 模板使用量 |
基因組DNA | 50 ng-200 ng |
質粒DNA | 100 pg-20 ng |
cDNA | 1-5 μL (不超過反應體系的1/10) |
PCR擴增程序
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
變性 | 95℃ | 30 sec | 35 |
退火 | 50-60℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
終延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |
【注】:1)退火溫度和時間:溫度推薦使用50-60℃。退火溫度過低會導致非特異性擴增。引物設計參考熒光定量引物標準。推薦退火時間設置為30 sec,可以在10-30 sec內調節。退火時間太長可能導致擴增產物在膠上呈彌散狀。也可根據需要,設立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度和時間。
2)延伸溫度和時間:溫度推薦使用72℃。時間推薦使用30 sec/kb。
3)擴增產物:請將PCR擴增產物放置于-20℃保存,防止DNA發生降解。
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產品名稱 | 貨號 | 規格 | 價格(元) |
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (with dye) | 10732ES03 | 1 mL | 96.00 |
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (with dye) | 10732ES08 | 5×1 mL | 432.00 |
HB210831