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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 250U |
---|---|---|---|
貨號 | 10322ES72 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格(元) |
Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/µL) 蝦堿性磷酸酶 | 10322ES72 | 250 U | 656.00 |
產品描述
Alkaline Phosphatase,中文名堿性磷酸酶,可將DNA、RNA的5’端磷酸基團去除,常用于阻止載體的自連作用:在分子克隆實驗中,DNA連接酶催化DNA連接時需要有磷酸基團的存在,載體在經酶切后會在切點端保留一個磷酸基團。而載體經堿性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端無磷酸基團,因而不可以和自身3’ 端連接。因此連接反應中載體本身會優先發生的連接反應被阻止,提高了目的片段插入率。另外,堿性磷酸酶還可制備用于5’端標記的DNA模板。
本品為蝦來源的堿性磷酸酶,可以降解幾乎所有磷酸單酯,但是該酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。該酶作用于末端去磷酸化,無論末端為粘端,還是平端。SAP 也可以用來降解PCR 反應中的dNTP,用于后續測序和SNP分析。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 |
10322ES72(250 U) | ||
10322-A | Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/µL) | 250 U |
10322-B | 10×SAP buffer | 1 mL |
產品性質
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃保存,有效期3年。
注意事項
1)1×SAP Buffer: 50mM Bis-Tris HCl (pH 6.0),1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,25℃溫育。
2)熱失活:65℃加熱5分鐘,不可逆失活。當完成去磷酸化反應后,無需純化產物,可以直接用于后續連接反應。
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4) 本產品僅作科研用途!
使用方法
DNA去磷酸化
① 在EP管中加入下列試劑*:
組分 | 體積 |
DNA 片段** | 1 pmol |
10×rSAP buffer | 2 µL |
Shrimp Alkaline Phosphatase (1 U/µL) | 1 µL |
無菌ddH2O | Up to 20 µL |
【*】可根據比例相應放大反應體系。
【**】1 pmol DNA段量約相當于1 ug 3kb大小的質粒。
③ 將EP管65℃,5 min溫浴,終止反應。
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HB220114