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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100U |
---|---|---|---|
貨號 | 10140ES60 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品信息
產品名稱
產品編號
規格
價格(元)
Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity DNA Polymerase
高保真DNA聚合酶 DNA Polymerase
10140ES60
100 U
653.00
Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity DNA Polymerase
高保真DNA聚合酶 DNA Polymerase
10140ES76
500 U
2453.00
產品描述
Hieff Canace® II High-Fidelity DNA Polymerase是新一代的高保真DNA聚合酶。該酶基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase,經基因工程改造而成。其蛋白結構包含5’→3’聚合酶結構域和經過改造的3’→5’外切酶結構域。這種組合大幅度提升了酶的耐熱性,保真性。耐熱溫度達到98℃,保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,普通Pfu DNA聚合酶的6倍。該酶主要為NGS文庫擴增所設計,克服了擴增不同GC含量模板帶來的GC-bias,同時擴增效率比第一代的Canace高1.5倍,文庫擴增產量大幅增加。本產品配備單獨的buffer,并增加了特殊的擴增促進劑,具有*的擴增效率和廣泛的模板適應性。此產品與我公司文庫擴增模塊2×Super Canace® II High-Fidelity Mix for Library Amplification (Cat#12621)所用酶原料一致。
產品組分編號
組分
規格
10140ES60(100 U)
10140ES76(500 U)
10140-A
Hieff Canace® II High-Fidelity DNA Polymerase(1 U/μL)
100 μL
500 μL
10140-B
2×Canace® II PCR buffer(含Mg2+,dNTPs)
1 mL×3
1 mL×15
產品應用基因克隆;復雜DNA模板擴增;高通量建庫。
活性定義用活性化的大馬哈魚精DNA作為模板/引物,74℃,30 min內,攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位(U)。
運輸與保存方法
冰袋運輸。
-20℃保存,有效期2年。
注意事項1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
2)本產品僅作科研用途!使用方法
在使用前,請務必仔細閱讀使用說明。
1、PCR反應體系(推薦冰上配制)
表1 PCR擴增反應體系
組分
體積
ddH2O
to 50 μL
2×Canace®Ⅱ PCR buffer (含Mg2+,dNTPs)
25 μL
模板或接頭連接產物
X
NGS Primer 1 (10-25 μM)
X μL
NGS Primer 2 (10~25 μM)
X μL
Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity DNA Polymerase (1 U/μL)
1 μL
【注】:1)試劑使用:使用前要充分解凍混勻;
2)聚合酶濃度:推薦使用1 U/50 μL。可以在0.5-2 U/50 μL之間進行優化;
3)Mg2+終濃度:體系終濃度為1.5 mM。如有特殊需要,可用50 mM MgCl2,以0.2-0.5 mM為間隔向上摸索;
4)高GC模板:在體系中加入終濃度為3%的DMSO可能有利于擴增。2、PCR擴增程序
表2 PCR擴增反應程序
步驟
溫度
時間
循環數
預變性
98°C
1 min
1
變性
98°C
10 sec
1~15(根據實驗要求)
退火
60°C
30 sec
延伸
72°C
30 sec
終延伸
72°C
5 min
1
Hold
4°C
Hold
-
相關產品產品名稱
產品貨號
規格
價格(元)
Hieff Canace® High-Fidelity DNA polymerase
10135ES60/76/80
100/500/1000 U
626/2356/4256
Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA polymerase
10144ES60/76
100/500 U
393/1993
HB210716