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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 生物產業 |
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Protein Silver Stain Kit蛋白質銀染試劑盒
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格(元) |
Protein Silver Stain Kit蛋白質銀染試劑盒 | 36244ES30 | 30 T | 4℃避光保存 | 683.00 |
產品描述
生化實驗中蛋白質通過凝膠電泳的方式分離后需經過染色才能肉眼可見,染色方法有兩種:1)染料染色法;2)金屬染色法。前者主要是考馬斯亮藍染色法,后者主要采用銀染法。前者操作比較簡單、省時,但是后者具有較高的檢測靈敏性,可檢測到10-100 ng蛋白質,比考馬斯亮藍染色法靈敏100多倍。
本試劑盒采用銀染的方法,用于檢測聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠中的微量蛋白質。
產品組分
編號 | 組分 | 規格 |
36244ES30 (30T) | ||
36244-A | 增敏液(100×) | 1×30 mL |
36244-B | 銀染液(100×) | 1×30 mL |
36244-C | 顯色液A | 1.5 mL |
36244-D | 顯色液B(5×) | 5×120 mL |
運輸和保存方法
冰袋運輸。4℃保存,1年有效。銀溶液、顯色液A需避光保存。
注意事項
1)需自備乙醇和冰乙酸(分析純)
2)顯色過程較快,要注意把握時間,避免染色過度。
3)所用器皿要很潔凈,不要用手直接接觸,以免雜蛋白污染。
4)使用說明中的使用次數及各種溶液的使用量適用于大小為8×10 cm厚度為0.75-1 mm的凝膠。對于更大的凝膠,各種溶液的使用量需按凝膠面積的比例放大,對于更厚的凝膠,作用時間需按照厚度的比例適當延長。
5)清洗用水盡量用高純度去離子水如dd H2O,可以減少背景著色。
6)本試劑盒也可以用于2D凝膠的銀染,并且染色后和后續的質譜檢測兼容。
7)使用本試劑盒只需 90 分鐘即可完成銀染實驗。
8)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1.試劑配制
1)固定液的配制(自備): 加入50 mL乙醇、10 mL冰乙酸和40 mL去離子水,混勻。
2)30%乙醇的配制(自備):70 mL去離子水中加入30 mL乙醇,混勻。
3)增敏液(1×)的配制:99 mL去離子水中加入1 mL增敏液(100×),混勻。增敏液(1×)配制后需在2 h內使用。
4)銀染液(1×)的配制:99 mL去離子水中加入1 mL銀染液(100×),混勻。銀染液(1×)配制后需在2 h內使用。
5)顯色液的配制:80 mL 去離子水中加入20 mL顯色液B(5×),再加入0.05 mL顯色液A,混勻后即為顯色液。顯色液配制后需在20分鐘內使用。
6)終止液的配制(自備):95 mL去離子水中加入5 mL 冰乙酸,混勻。
2.使用方法
以10 cm2凝膠為例,不同凝膠大小可按比例調整增敏液、銀染液和終止液的體積。
1)固定:電泳結束后,取凝膠放入約100 mL固定液中,在搖床上室溫搖動20分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
2)洗滌:棄固定液,加入100 mL 30%乙醇,在搖床上室溫搖動10 min,搖動速度為60-70 rpm。棄30%乙醇,加入200 mL去離子水,在搖床上室溫搖動10分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
3)增敏:棄水,加入100 mL增敏液(1×),在搖床上室溫搖動2分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
4)洗滌:棄原有溶液,加入200 mL去離子水,在搖床上室溫搖動1min×2,搖動速度為60-70 rpm。
5)銀染:棄水,加入100 mL銀染液(1×),在搖床上室溫搖動20分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
6)洗滌:棄原有溶液,加入100 mL 去離子水,在搖床上室溫搖動0.5 min×2,搖動速度為60-70 rpm。
7)顯色: 棄水,加入100 mL顯色液,在搖床上室溫搖動3-10分鐘,直至出現比較理想的預期蛋白條帶,搖動速度為60-70 rpm。
8)終止:棄顯色液,加入100 mL終止液,在搖床上室溫搖動10分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
9)洗滌:棄原有溶液,加入100 mL 去離子水,在搖床上室溫搖動0.5 min×2,搖動速度為60-70 rpm。
10)保存顯色出的蛋白質條帶并記錄。
HB191126