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11112ES92第四代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 11112ES92 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：420更新時間：2022-02-09 15:52:00
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- 網(wǎng)址：
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10000 U |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 11112ES92 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 全長cDNA文庫構(gòu)建；終點(diǎn)法PCR；實(shí)時定量PCR等。 |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hifair® IV Reverse Transcriptase 第四代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11112ES92 | 10000 U | 1525.00 |
Hifair® IV Reverse Transcriptase 第四代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11112ES93 | 5×10000 U | 5425.00 |
產(chǎn)品描述
Hifair® IV Reverse Transcriptase是在Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase基礎(chǔ)上通過基因工程技術(shù)得到的全新逆轉(zhuǎn)錄酶，與Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比，其熱穩(wěn)定性大幅度提高，可耐受60℃，適合具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。同時，該酶增強(qiáng)了與模板的親和力，適合低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄和mRNA文庫構(gòu)建。Hifair® IV Reverse Transcriptase合成全長cDNA的能力也有了提升，可擴(kuò)增長達(dá)10 kb的cDNA。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
11112ES92 (10000U) | 11112ES93 (5×10000U) | ||
11112-A | 5×Hifair® IV Buffer | 250 μL | 1200 μL |
11112-B | Hifair® IV Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
產(chǎn)品應(yīng)用
全長cDNA文庫構(gòu)建；終點(diǎn)法PCR；實(shí)時定量PCR等。
活性定義
以Poly(A) .Oligo(dT)為模板-引物，在37℃，10 min內(nèi)，將1 nmol的dTTP摻入為酸不溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個活性單位（U）。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。
-20 oC保存。有效期一年。
注意事項
1）請保持實(shí)驗(yàn)區(qū)域潔凈；操作時需穿戴干凈的手套、口罩；實(shí)驗(yàn)所用耗材均需保證RNase free，以防止RNase污染；
2）所有操作均應(yīng)在冰上進(jìn)行，防止發(fā)生RNA降解；
3）為保證逆轉(zhuǎn)錄成功，建議使用高質(zhì)量的RNA樣本；
4）為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
5）本產(chǎn)品僅作科研用途！
第一鏈cDNA合成操作步驟
1. RNA變性（此步為可選步驟，RNA變性有助于打開二級結(jié)構(gòu)，可在很大程度上提高第一鏈cDNA的產(chǎn)量。）
組分 | 使用量 |
RNase free ddH2O | to 13 μL |
Oligo (dT)18 (50 μM) or Random Primers (50 μM) or Gene Specific Primers(2 μM) | 1 μL or 1 μL or 1 μL |
模板RNA | Total RNA: 10 pg -5 μg或mRNA:1 pg-500 ng |
65℃加熱5 min，迅速置于冰上冷卻2 min。簡短離心收集反應(yīng)液后加入下表中的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液，并用移液器輕輕吹打混勻。
2. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液配制
組分 | 使用量 |
上一步的反應(yīng)液 | 13 μL |
5×Hifair® IV Buffer | 4 μL |
dNTP Mix(10 mM) | 1 μL |
Hifair® IV Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 1 μL |
RNase Inhibitor (40 U/µL) | 1 μL |
3. 逆轉(zhuǎn)錄程序設(shè)置
溫度 | 時間 |
25℃ | 5 min |
50℃ | 15min |
85℃ | 5 min |
【注】：1）當(dāng)使用Random Primers時，需25℃，孵育5 min；若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers，此步可省略；
2）逆轉(zhuǎn)錄溫度：推薦使用50℃。對于高GC含量模板或者復(fù)雜模板，可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高到55℃-60℃；
3）85℃加熱5 min，目的是使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。
※ 逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)PCR或qPCR反應(yīng)，也可-20℃短期保存，若需長期保存，建議分裝后，于-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 價格（元） |
Hifair® II Reverse Transcriptase 第二代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11110ES92/93 | 10000/5×10000 U | 626/2456 |
Hifair® III Reverse Transcriptase 第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11111ES92/93 | 10000/5×10000 U | 1426/4626 |
HB210909
