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產品簡介
產品介紹
HB161219
Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody
兔免疫組化（IHC）檢測試劑盒
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody 兔免疫組化（IHC）檢測試劑盒 | 36312ES64 | 150T | 4℃ | 548 |
產品描述
翊圣IHC Kit for Rabbit Primary Antibody可用于檢測以兔單克隆或多克隆抗體為一抗的免疫組化實驗，檢測原理基于高特異性高親和力的鏈霉親和素-生物素結合：已固定或培養細胞的抗原與一抗形成抗原抗體復合物，生物素化二抗特異性結合上述復合物，經辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素特異性識別生物素（即抗原所在位置），zui后經辣根過氧化物酶底物顯色即可檢測相應抗原。
本品可適用于多種類型樣本，如石蠟包埋切片、冰凍切片、培養細胞涂片及血液標本等。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 |
36312-A | Normal goat serum for IHC 封閉液 | 7.5ml |
36312-B | Biotin-conjugated Anti-Rabbit IgG 生物素標記抗兔二抗 | 7.5ml |
36312-C | HRP-conjugated Streptavidin HRP 標記鏈霉親和素 | 7.5ml |
36312-D | 20× DAB Substrate Buffer 20×DAB底物緩沖液 | 400µl |
36312-E | 20×H2O2 Stock Solution 20×H2O2濃縮液 | 400µl |
36312-F | 20×DAB Stock Solution 20×DAB濃縮液 | 400µl |
運輸和保存方法
冰袋運輸。4℃保存，有效期1年。勿冰凍！
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2）DAB是一潛在致癌物，使用時請注意自我防護。
3）檢測樣本時需同時做陰性對照和陽性對照。
準備試劑
1）二甲苯、乙醇、甲醇
2）去離子水
3）30%過氧化氫溶液（Cat# 36216）
4）1×PBS, PH7.4（Cat#60145）
5）蘇木素染色液（Cat#60502）
6）封片劑（Cat#36313）
使用方法
1 樣品準備
染色前用PBS浸泡組織或細胞涂片10min。石蠟切片于室溫下用二甲苯常規脫蠟、入水、抗原修復。
【注】：從此步驟起，嚴禁標本或組織切片干燥。
2 染色（以石蠟切片為例）
1）將處理好的石蠟切片放入3% H2O2-甲醇溶液中浸泡10min，以消除內源性過氧化氫酶的作用。
2）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
3）封閉：加一滴封閉液于組織切片上（需*覆蓋待檢組織）孵育10min。
4）倒掉或吸干液體（不要沖洗）。
5）一抗孵育：每張切片加2滴（100μl）或適量一抗（需*覆蓋待檢組織），濕盒內孵育30-60min。
6）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
7）二抗孵育：每張切片加一滴生物素標記抗兔二抗（需*覆蓋待檢組織），孵育10min。
8）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
9）酶孵育：每張切片加一滴HRP標記鏈霉親和素（需*覆蓋待檢組織），孵育10分鐘。
10）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
11）制備DAB顯色液。
按照【20×DAB濃縮液：20×H2O2濃縮液：20×DAB底物緩沖液：水=1:1:1:20】的比例進行配制顯色液，以1張切片為例，分別吸取上述3種溶液各2.5µl溶于50µl去離子水中，充分混勻即可。
【注】：① DAB顯色液需現配現用，避光放置，且在30min內使用。
② 可根據需要一次染多張切片，各種試劑量按照上述比例放大即可。
12）顯色：向切片上滴加一滴上述DAB顯色液，室溫顯色2-5min（此步可在顯微鏡下控制顯色程度）。
13）自來水充分沖洗。
14）用合適復染劑復染，鹽酸酒精分化。
15）繼續后續脫水、透明、封片、鏡檢。
3 結果判定
陽性結果處顯處染棕黃或棕褐色。
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