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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 |
|---|
產品介紹
Endotoxin Removal Kit 內毒素去除試劑盒
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
Endotoxin Removal Kit 內毒素去除試劑盒 | 60404ES03 | 1Kit | 4℃ | 1680.00 |
產品描述
細菌內毒素可引起機體免疫功能受損，嚴重者可引發膿毒性休克，急性呼吸窘迫綜合癥，彌散性血管內凝血，全身炎癥反應綜合癥或致命性多器官功能衰竭等。因此對于用于疾病治療的基因藥物、蛋白藥物、單抗克隆藥物、治療性疫苗、小分子化學藥物等生物制品必須通過一定的方法去除內毒素。
翊圣提供的內毒素去除樹脂以修飾過的多粘菌素B（PMB）為配體，可高效特異的將生物制品中內毒素去除，經純化樣品zui終的內毒素水平可＜0.1EU/ml，適合于蛋白，多肽，抗體，多糖等多種形式樣品的純化。本品以預裝柱的形式提供，另附帶用于去除內毒素的其他試劑（如相關緩沖液）以及無熱源耗材等，方便客戶使用。
產品性質
基質（Matrix） | 4%瓊脂糖微球 |
配體（Ligand） | 修飾的多粘菌素B（PMB） |
孔徑（Bead size） | 80-100µm |
載量（Capacity） | ＞2,000,000EU/ml樹脂 |
pH穩定范圍（pH range） | 5-10 |
離子范圍（Ion Range） | 0.1-0.5M NaCl |
平衡緩沖液（Equilibration Buffer） | PBS，pH8.0 |
耐受試劑（tolerant reagent） | 20% DMSO，20% 乙醇，20% 甘油； 0.05% 吐溫-20，10mM DTT；1M 尿素；300mM咪唑等 |
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 規格 |
60404-A | Endotoxin Removal Chromatography Column 內毒素去除樹脂預裝柱 | 2ml |
60404-B | Regeneration Buffer 再生緩沖液 | 125ml |
60404-C | Equilibration Buffer平衡緩沖液 | 125ml |
60404-D | Pyrogen-free Tubes無熱源接收管 | 1包（3個/包） |
60404-E | Pyrogen-free Tips無熱源吸頭（1ml） | 3包（4個/包） |
運輸和保存方法
冰袋運輸。4℃保存，有效期至少1年。
使用方法
1. 樣品處理：多粘菌素B和內毒素是通過靜電作用，離子作用，親水作用和分子間相互作用等多種因素共同作用的結果，因此實驗中存在的若干因素都可能會影響內毒素去除效率，如：緩沖液的pH值，內毒素濃度，內毒素與樹脂的接觸時間，離子強度，溫度以及樣品的特性等。其中樣品pH值和離子強度對于內毒素的去除效率影響尤其重要，純化前可用處理過的氯化鈉，0.1M的NaOH或0.1M HCl來調節離子強度或pH值。
【注】：① 雖然結合內毒素的pH范圍在5-10，但是7-8的pH范圍是純化的*范圍。
② 合適的離子濃度可降低非特異性吸附，保持0.15-0.5M NaCl的條件可以得到一個較好的去除效果。
2. 活化樹脂：將預裝柱置于鐵架臺，垂直固定，去除頂部蓋子，打開流速控制器，使保護液在重力作用下流干，加入5ml再生緩沖液，調節流速控制器，保持流速在0.25ml/min（或10滴/min），待再生緩沖液流干后再加入5ml再生緩沖液，再重復操作2次，確保體系保持無熱源（即內毒素）存在。即使是*次使用也必須進行這一步操作。該步操作大約需要60min完成。
3. 平衡樹脂：活化完畢后加入6ml的平衡緩沖液，調節流速控制器，保持流速在0.5ml/min，流干平衡緩沖液，再按此操作重復2次。這步操作大約需要40min完成。
4. 內毒素去除：將流速控制器關閉，使用無熱源槍頭將樣品加入，打開控制器，控制流速不高于0.25ml/min，流出液體積達到1.5ml后，使用無熱源接收管接收樣品，樣品流干后，再加入1.5ml-3.0ml的平衡緩沖液淋洗，收集淋洗液。檢測樣品濃度及內毒素水平。
5. 再次使用：如果流出樣品內毒素水平未能達到預期值，需要將預裝柱按照步驟2重新再生，然后上樣純化。
6. 保存條件：如果預裝柱用完后需要保存，先用10ml平衡緩沖液平衡柱子，待平衡液流干，加入1.5ml的再生緩沖液（含0.02%的疊氮化那）。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
附表
問題 | 可能原因 | 解決方法 |
去除效率低 | 樣品與樹脂接觸時間太短 | 降低樣品流速，或通過低溫孵育來提高結合效率 |
樣品的pH值沒有在7-8之間 | 調節pH值至7-8 | |
去除或檢測系統受到外來因素污染 | 使用無熱源的實驗儀器，保證體系不受污染 | |
內毒素與目的蛋白結合太牢固 | ① 優化樣品的pH值，使它們解離； ② 增加樣品與樹脂的接觸時間 | |
樣品損失高 | 樣品通過非特異性作用結合在樹脂上 | 增加樣品和平衡緩沖液中NaCl的含量 |
目的蛋白與內毒素結合牢固，一起結合在樹脂上 | ① 優化樣品的pH值，使它們解離； ② 增加樣品與樹脂的接觸時間 | |
樣品被污染 | 樹脂用于處理過其他的樣品 | 盡量避免使用同一個預裝柱處理不同樣品。如果無法避免，可以在處理一個樣品之后，用10-20ml 2M NaCl淋洗樹脂，然后再處理另外一種樣品 |
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