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Hematoxylin and Eosin Staining Kit  

蘇木素伊紅（H&E）染色試劑盒

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

蘇木素（Hematoxylin）是一種從洋蘇木提取的天然染料，以Mayer’s，Gill’s和Harris等多種配方形式普遍用于細胞核，線粒體，粘蛋白，彈性纖維，肌肉，膠原，髓鞘和磷脂的染色，檢測原理是帶正電荷的堿性染料蘇木素與帶負電荷的酸性物質結合使其被染成藍色。

伊紅（Eosin），又稱曙紅，一種紅色熒光染料，在水中解離成帶負電荷的陰離子，能夠與蛋白質氨基中帶正電荷的陽離子結合從而使細胞質、紅細胞、膠原、肌纖維、結締組織、嗜伊紅顆粒等染成不同程度的紅色或者粉紅色。作為一種酸性染料，常用于蘇木素-伊紅染色法（H&E Staining），用作蘇木素的復染劑。

蘇木素-伊紅（H&E）的結合染色使得細胞質呈紅色，細胞核顯藍紫色，紅細胞呈桔紅色，其它成分呈深淺不同的紅色，可用于免疫組化中組織切片，血涂片，骨髓切片的染色，也能用于細胞涂片的染色，是細胞生物學、組織學及病理學等學科*的zui常規(guī)染色方法之一。

產(chǎn)品組分

運輸和保存方法

室溫運輸；室溫保存，有效期至少1年。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、樣本前處理

1）石蠟切片

① 脫蠟：用無毒環(huán)保脫蠟劑或二甲苯脫蠟，10-15 min/次，共2缸2次；

② 梯度入水：95%、70%、30%乙醇各2 min，溫水2 min，如果脫蠟不干凈，需再次溫水2 min。此時玻片上除樣本部分略有水分外，玻片其余部分均應無水珠。

2）冰凍切片

① 回溫：按以下方法將預先制作好的并保存在-20℃的冰凍切片取出回溫（選取其中一種即可）：

A、室溫放置回溫5-10 min。

B、37℃孵育箱中進行回溫。

C、在37℃水浴箱中放置一個小盒子，再將從-20℃取出的冰凍切片放到小盒當中，目的是讓冰凍切片回溫至37℃。

② 水合：將回溫好的切片，水中浸泡30-60 s左右。

【注】：冰凍切片用防脫載玻片，切好的片子如不及時染色可放-20℃保存，染色前不要用乙醇等固定，否則易造成掉片。

3）血涂片及骨髓涂片

① 推片：取全血3 µL左右置載玻片上，將推玻片與載玻片保持30°角，置于血滴正前方，稍往后移與血滴接觸，血滴沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動，至血液鋪完血膜為止。

② 涂片空氣中自然干燥，95%乙醇固定2-3 min，水洗約30-60 s。

二、 樣本染色

1）組織潤濕：染色前用蒸餾水潤濕組織1-2 min，確保蒸餾水覆蓋整個組織，使水分均勻分布；

2）胞核染色：蘇木素染色液染色5 min，水洗3-5 s。

3）胞漿染色：可選用以下方法中其中一種進行染色：

① 伊紅染色液染色10-30 s，用增色液沖洗1-2次，濾紙吸干或自然晾干；

【注】：此法可立即封片鏡檢。

② 伊紅染色10-30 s，在水中蘸1-2次（10 s左右），濾紙吸干或自然晾干；

【注】：此法需無水乙醇脫水二次后再封片鏡檢。

③ 伊紅染色2 min，用蒸餾水洗1-2 min，濾紙吸干或自然晾干；

【注】：此法需無水乙醇脫水二次后再封片鏡檢。

三、 鏡檢結果

胞漿呈紅色，胞漿呈藍紫色，紅細胞呈桔紅色，其它成分呈深淺不同紅色。

【注】：若染色較淺，可延長染色時間或者重復染色一次；若染色較深，可延長水沖時間或者再重復梯度脫水一次。

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