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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
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Endotoxin Removal Agarose Resin, High Performance
產品簡介
Endotoxin Removal Agarose Resin是一種用于去除生物源蛋白類產品(包括蛋白、多肽、抗體、多糖等)中內毒素的樹脂。其原理是將修飾過的多素B連接至4%瓊脂糖微球上,進行特異性去除內毒素,經純化可將樣品中內毒素降低至0.1 EU/mL,且樣品回收率高。
產品信息
貨號 | 20518ES10/ 20518ES60/20518ES76 |
規格 | 10 mL /100 mL / 500 mL |
產品性質
基質(Matrix) | 4%瓊脂糖微球 |
配體(Ligand) | 修飾過的多素B |
粒徑(Bead size) | 45-165 µm |
載量(Capacity) | >2000000 EU/mL基質 |
最大壓力(PressureMax) | 0.1 MPa, 1bar |
pH穩定范圍(pH range) | 5-10 |
儲存緩沖液(Buffer) | 20%乙醇 |
儲存條件
2~8℃保存,有效期2年。
需準備試劑
所用水和Buffer以及耗材均需無熱原處理,防止在使用過程中引入內毒素。
平衡液:20 mM 磷酸鹽,150 mM NaCl,pH7.4。
再生液:1% Triton X-114的平衡液
【注】平衡液和洗脫液可根據樣品性質進行改變,建議pH7-8, NaCl約150 mM-500 mM。
使用說明
【注】a 樣品在上樣前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾,減少雜質以防阻塞柱子;
b 內毒素結合柱子的最佳pH為6-9,因此樣品pH最好控制在7-8;
c 樣品最好控制在適當的離子強度,減少非特異吸附,NaCl約150 mM-500 mM。
樣品純化(以1 mL樹脂為例)
1)裝柱:充分混勻Endotoxin Removal Agarose Resin,用無熱原槍頭吸取適量漿液加入合適的層析柱中,注意避免產生氣泡,打開下出口去掉保護液,用3 mL再生液進行清洗,控制流速在0.25 mL/min,或<10滴/min,溫度控制在2~8℃,重復至少2次,確保柱中無內毒素。
2)平衡:用3 mL的平衡液平衡柱管內壁及樹脂,流干,流速約0.5 mL/min,溫度控制在2~8℃,重復至少兩次。
3)過柱及檢測:將樣品加到平衡好的樹脂中,調節流速在0.25 mL/min,或<10滴/min,當流出液流出約1 mL 時,開始收集流出液,流干后加入1 mL平衡液繼續收集。檢測樣品中內毒素含量及樣品回收率。
【注】如果樣品中內毒素含量仍高于目標值,繼續重復1-3。
注意事項
1.本品可耐受試劑:20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1 M尿素,300 mM咪唑;0.05% Tween 20,10 mM DTT等。
2.本產品僅作科研用途。
3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
附表 問題及解決方案
問題 | 原因分析 | 推薦解決方案 |
內毒素去除效率低 | 樣品pH值不在內毒素結合范圍內 | 用0.1 M NaOH或0.1 M HCl調節至pH7-8 |
樣品與樹脂接觸時間短 | 減少流速,增加樣品接觸時間 | |
去除或檢測系統被內毒素污染 | 所有試驗用品均需無熱源產品 | |
內毒素與目的蛋白結合較強 | 優化樣品pH,使樣品與內毒素分離 增加接觸時間 | |
樣品被污染 | 樹脂純化過其他樣品 | 不用使用過的樹脂去除不同樣品內毒素 |
樣品回收率低 | 樣品非特異性吸附在樹脂上 | 增加樣品和平衡液的NaCl濃度 |
目的蛋白與內毒素結合一起被去除 | 優化樣品pH,使樣品與內毒素分離 |
Ver.CN20230719