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- 40715ES25 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):729更新時(shí)間:2022-02-10 14:53:55
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25mg |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 40715ES25 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 保存 | 價(jià)格(元) |
CFDA, SE 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針 | 40715ES25 | 25mg | -20°C 避光干燥保存 | 1599.00 |
產(chǎn)品描述
CFDA, SE,英文全稱Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞示蹤染料,不僅可用于細(xì)胞增殖的體外實(shí)驗(yàn),還可用于追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分裂增殖過程。
CFDA, SE是二乙酸熒光素(Fluorescein diacetate,F(xiàn)DA)的衍生物,具細(xì)胞膜滲透性,本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過被動(dòng)運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后,可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester,CFSE),可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光,不能穿透細(xì)胞膜,能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上,同時(shí)過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi),被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月,因此非常適用于細(xì)胞群落分析。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀(FL1通道)根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度),二次(1/4的熒光強(qiáng)度),三次(1/8的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSA,SE可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè),也可用于成纖維細(xì)胞,自然殺傷細(xì)胞,造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測(cè)。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,Ex=494nm,Em=521nm,除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖外,還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。本品以粉末形式提供,需用DMSO制備儲(chǔ)存液后再使用。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文名稱(Chinese Synonym) | 5(6)-羧基二乙酸熒光素琥珀酰亞胺酯 |
英文名稱(English Synonym) | 5-(and 6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester |
CAS號(hào)(CAS NO.) | 150347-59-4 |
分子式(Molecular Fomular) | C29H19NO11 |
分子量(Molecular Weight) | 557.46 |
純度(Purity) | ≥94%(HPLC) |
外觀(Appearance) | 類白色固體 |
Ex/ Em | 494/521 nm |
結(jié)構(gòu)式(Structure) |
運(yùn)輸與保存
室溫運(yùn)輸。-20℃干燥避光保存,有效期一年。避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
1)不同的細(xì)胞其細(xì)胞內(nèi)酯酶活性不同,因此染色效果具有差異性。
2)熒光染料均存在淬滅問題,染色過程需盡量避光。
3)為了您的健康,實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服和帶一次性手套。
操作方法
1. CFSE儲(chǔ)存液(5mM)的配制
用1ml DMSO溶解2.79mg CFSE,充分混勻即得到5mM的儲(chǔ)存液(1mg/mL的CFSE溶液濃度相當(dāng)于其摩爾濃度1.8mM)。
注意:該儲(chǔ)存液需立即使用,根據(jù)使用量計(jì)算如有剩余請(qǐng)務(wù)必分裝后于≤-20℃避光干燥保存,避免反復(fù)凍融。
2. CFSE工作液(0.5-5µM)的配制
使用前用含20mM Hepes的Hanks 緩沖液(HHBS)或其他不含氨基的合適緩沖液(pH=7.0)對(duì)上述CFSE 儲(chǔ)存液進(jìn)行1,000~10,000倍稀釋,并旋渦震蕩混勻。
3. 操作方法
注意:以下是針對(duì)活細(xì)胞染色的推薦步驟,可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
1)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,用適當(dāng)藥物處理細(xì)胞;
2)離心收集細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞濃度為1-5×105個(gè)/管;
3)用500µL CFSE工作液懸浮細(xì)胞,于室溫或37℃避光孵育10-30min;
4)吸除CFSE 染液,用HHBS或其他合適緩沖液清洗細(xì)胞,用500µL預(yù)熱HHBS或培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞;
5)在Ex/Em=490/520nm下用流式細(xì)胞儀(FL1通道)或熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
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