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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100ml |
---|---|---|---|
貨號 | 10604ES60 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格(元) |
RNAsafe Tissue Stabilizer RNAsafe動植物組織RNA穩定液 | 10604ES60 | 100 mL | 457.00 |
產品描述
RNA酶廣泛存在環境中,很容易降解新鮮采取的動植物組織、血液、體液等樣本中的RNA,從而使得研究人員在收集完新鮮樣本需要做液氮速凍,或者立即進行RNA的純化,這給研究人員的戶外工作帶來諸多不便。
RNAsafe動植物組織穩定液(RNAsafe Tissue Stabilizer)是專門開發用于穩定并保護采集樣本內RNA,作為一種無毒溶液,可迅速滲入組織,滅活內源RNase。
產品特點
操作極其簡便:只需要將新鮮組織切成合適大小(≤0.5cm)的組織塊,浸入5~10倍體積的RNAsafe中即可。
穩定周期長:經RNAsafe浸潤的組織/細胞可在37℃保存1天,室溫保存1周,4℃保存4周,-20℃/-80℃長期保存。
下游兼容性廣:幾乎兼容于所有的RNA分離方法,如HieffTM Total RNA Extraction Reagent(貨號:10606ES60),以及幾乎所有的商業化RNA抽提試劑盒,包括離心柱抽提法,磁珠純化法等。
材料應用性廣:可用于多種動植物組織(如腦、心臟、肝臟、胰臟、腎臟、脾臟、睪丸、肌肉、植物的莖葉等)的保存,還可用于酵母、組織培養細胞等。
操作流程
1. 樣品處理
A. 動物組織:RNAsafe穩定液不會破壞動物組織結構的完整性。
處理過程:將組織切成合適大小后(≤0.5cm),然后加入5倍體積RNAsafe。
注:已浸入RNAsafe的組織經平衡一段時間后,可從溶液中取出,切成更小的組織塊(≤0.5cm大小),再重新放回RNAsafe。
注意:某些組織(如骨頭)具有比較弱的液體滲透性,不適合用本品進行RNA保護。
B. 植物組織:本品對于柔軟的植物組織(如嫩葉,嫩莖)可直接滲透,且達到理想的RNA保護效果。
處理過程:將組織切成合適的大小(≤0.5cm)后,加入5倍體積的RNAsafe穩定液。
注:某些植物組織天生具有的屏障(如葉子表面的蠟層)可阻礙RNAsafe滲透,對于此類組織,往往需要破壞這些屏障層以允許溶液的浸透。
C. 組培細胞、白細胞等:按照標準實驗操作收集細胞沉淀(用PBS清洗1-2次)。之后加入5~10倍體積的RNAsafe。
D. 酵母:離心棄上清,收集約108個細胞(12,000g,2min)。加入0.5~1ml RNAsafe。
長期保存:應置于RNAsafe中,4℃放置1小時。然后離心棄上清,收集酵母細胞(12,000g,5min),-80℃保存。
2. 樣品保存
A. -80℃保存:樣品結凍保存。對于歸檔的樣本,建議-80℃保存。該保存條件下,樣本可長期保存,保護效果佳。
操作過程:樣本4℃浸透過夜,然后再轉移至-80℃。
如果中間需要做樣本的融化,建議取出4℃浸透過夜的組織或離心收集細胞,然后再凍存于-80℃。RNAsafe保護后的樣本抽提RNA時,可直接放在室溫融化,之后重新凍上,不會造成RNA量的嚴重損失或者RNA完整性的明顯破壞。
B. -20℃保存:同樣適用于歸檔樣本的保存。樣本不會在-20℃結凍,但可能會形成結晶。該保存條件下,樣本可長期保存,不會對后續RNA分離造成影響。
操作過程:樣本4℃浸透過夜,然后再轉移至-20℃。RNAsafe保護后的樣本抽提RNA時,可直接放在室溫融化,之后重新凍上,不會造成RNA量的嚴重損失或者RNA完整性的明顯破壞。
C. 4℃保存:大部分樣品放到RNAsafe中,可穩定保護1個月,不會有明顯的RNA降解發生。
D. 25℃(室溫)保存:建議低溫環境保存。若條件不允許,請將RNAsafe穩定液于冰上冷卻幾個小時,然后將樣品浸入此溶液中,室溫穩定保存1周,不會有明顯的RNA降解發生。
E. 37℃保存:純化的RNA樣本于37℃孵育24h,結構依然完整。
3. RNA提取
因RNAsafe滅活RNase的過程是可逆的,受保護的樣本使用前務必不要清洗掉RNAsafe。
A. 組織樣本:用滅菌鑷子從RNAsafe中取出組織塊,然后用干凈的吸水紙吸掉表面液體。之后立即置于裂解液中勻漿。
B. 細胞樣本:由于RNAsafe密度較大,此時需要使用大于普通介質的離心力。一般來說,保存在RNAsafe中的細胞能承受更高的轉速,并維持細胞的完整性。大部分細胞可通過5,000g,5min離心收集沉淀。
注意:由于不同細胞承受離心力會有差異,建議先用少量的細胞進行離心速度承受性的測試。
C. 抽提RNA:按照RNA抽提Protocol進行即可。
運輸與保存方法
室溫運輸,室溫保存,有效期5年。
注意事項
1. 經RNAsafe處理的樣本還可做基因組DNA的提取,甚至蛋白質的提取。但由于RNAsafe會變性蛋白質,因此不適合天然蛋白的提取。
2. 本RNAsafe室溫保存過程中可能會產生一些沉淀,在使用前只需放到37℃溫育片刻,并間斷搖晃重溶,不影響使用。
3. 本RNAsafe僅適用于新鮮組織,不可用于冰凍組織。若需要保護冰凍組織內RNA的完整性,可使用我司的RNAsafe-ICE冰凍動植物組織RNA穩定-過渡溶液(貨號:10605ES60),即可將冰凍組織恢復為勻漿用的組織狀態,并進行RNA抽提的過程中,維持RNA的穩定性。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
相關產品
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
RNAsafe-ICE冰凍動植物組織RNA穩定-過渡溶液 | 10605ES60 | 100 mL |
Proteinase K 蛋白酶K | 10401ES60/80 | 100 mg/1 g |
Lysozyme溶菌酶 | 10402ES08/50 | 5/50 g |
Lyticase (10 U/μl) 溶壁酶 | 10403ES81/88/ 92 | 1500/3000/10000 U |
Snailase 蝸牛酶 | 10404ES08/10 | 5/10 g |
TRIeasyTM Total RNA Extraction Reagent(同Trizol)HOT | 10606ES60 | 100 mL |
HB210722