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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品介紹
用途：
用于體外分離外周血淋巴細胞，也可以從其他來源中分離單核細胞，包括臍帶血細胞和骨髓細胞。
方法概述：
早期分離白細胞的方法，會用一種化合物混合血液。此化合物能夠聚集紅細胞，只輕微影響白細胞。通過離心，紅細胞由于密度增加而聚集沉淀，同時從離心管內上層收集白細胞。
Böyum提出了一種更方便快速的分離方法，即以Ficoll®-甲泛影鈉溶液為介質進行離心。稀釋的血液在Ficoll-甲泛影鈉溶液中分層，之后低速短時離心。紅細胞和多形核粒細胞沉降到管底，單個核細胞（淋巴細胞）和血小板可以從兩個分層間的分界面處收集。
許多研究者不斷改進了Böyum方法，對于MP生物醫學公司生產的LSM，其方法的*之處在于成功運用泛影酸鈉代替了甲泛影鈉。
程序原理：
去纖維蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋，在分離溶液中分層，低速離心30min。離心過程中，由于差速遷移zui終形成不同的細胞層。
聚集在管底的顆粒主要是紅細胞和多形核粒細胞，它們通過梯度遷移至管底。由于其密度不同，淋巴細胞和其他單個核細胞（單核細胞和血小板）分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細胞可以通過吸取分界層溶液回收，zui后進一步清洗去除血小板，LSM和血漿。
試劑：
LSM® 是一種濾膜過濾除菌的溶液，每100ml包含6.2g聚蔗糖和9.4g泛影酸鈉。20℃下密度是1.0770-1.0800g/ml。
使用說明：
以下的操作步驟是zui初由Böyum.設計的程序中眾多改良版本的一種。此程序經改良用于去纖維蛋白或抗凝血劑處理過的人體血液；對于其他物種或者其他組織的血液，改變此程序也許是有必要的。
1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
2. 無菌轉移3 ml LSM到15 ml離心管中。
3. 混合2 ml去纖維蛋白血液或肝素化血液和2 ml 生理鹽水
4. 仔細的將稀釋血液加入含有3 ml LSM（室溫）的15ml離心管中，在血液和LSM中形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。
5. 室溫下400xg離心15-30min，離心可以沉淀紅細胞和多形核白細胞，同時可以在LSM上形成一層單核淋巴細胞，如上圖所示（具體分層情況為血漿層-單個核細胞層-LSM層-RBC顆粒）。
6. 吸出淋巴細胞上方2-3mm的血漿。
7. 吸取淋巴細胞層以及它下面一半的LSM，并轉移到另外一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內的淋巴細胞層中，室溫（18-25°C）離心10分鐘，離心速度設定在既不損傷細胞又能沉淀細胞即刻，例如160 – 260 xg（清洗去除LSM，并降低血小板的百分比）。
8. 再用平衡鹽緩沖液清洗細胞，zui后用適當的培養基重懸細胞。
訂購信息：相當于sigma公司的Histopaque®-1077產品
名稱 | 貨號 | 規格 | 單價 | * |
淋巴細胞分離液（MPbio公司產品） | 0850494X | 100ML | 596元 | 221元 |
0850494 | 100ML*5 | 1549元 | 1150元 | |
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廠家說明
MP Biomedicals生物醫學公司是位于美國加利福尼亞州的生命科學和生物技術廠商。2004年底成功收購Qbiogene、ICN，現在有5個大型倉庫，能夠及時供應各行業需求，亞洲倉庫位于新加坡。它致力于生命科學領域的基礎研究和探索。目前它提供55000多種產品，是世界上能全面提供生命科學產品和臨床診斷產品的幾家廠商之一。
