對于某些比較透明的被檢物體，普通光學顯微鏡不能有效的觀察其細節，只能通過暗場顯微技術來達到觀察目的。暗場顯微鏡技術是利用斜射照明法阻擋透過標本細節的直射光，以反射光和衍射光來觀察標本。在普通顯微鏡下直射光透過標本的時候，一部分光被吸收，另一部分光透射或折射，形成標本細節內部結構的真實投影。因此，在普通顯微鏡下所看到的是物體形態和結構。普通顯微鏡下可以看到0.45um的細節，而暗場顯微鏡下竟能看到0.2-0.004um的極徽小物體。這個范圍的物體叫亞粒子,因此暗場顯微鏡也可以稱裂隙限外顯微鏡。而在暗場顯微鏡下從側面照射到物體的光束，繞射或反射造成物體外形的側影。因此暗場顯微鏡下所看到的只是物體的輪廓或物體的運動。

暗場顯微鏡特別適用于膠體化學領域中觀察溶質粒子的布朗運動，適用于觀察原蟲、細菌的鞭毛、偽足運動，醫學檢驗學范圍適用于觀察人體體液中螺旋體、尿管形、結晶或各種粒子.在這一點上，暗場顯微鏡遠比其他種類顯微鏡要*得多。在多功能顯微鏡上，可以通過加裝暗場附件達到組成暗場顯微鏡的目的，而暗場顯微鏡的zui關鍵部件是暗場聚光鏡。

尼康顯微鏡是尼康光學儀器公司的下屬品牌。尼康公司成立于 1917 年，由當時三家日本光學產品制造商合并而成，公司zui初的名字叫日本光學工業株式會社 ("日本光學")，主要進行精密光學玻璃的制造與研發。1925 年，尼康制造出了*臺配有可旋轉物鏡轉盤和可更換物鏡的顯微鏡 – Joico 顯微鏡?，F今，尼康已成為zui為的品牌，在光學儀器市場牢牢占據了地位，作為*一家生產自用玻璃的顯微鏡企業，整個生產活動為其提供了細致入微的*。憑借在光學儀器領域 90 多年持續不斷的專家知識積累，加之將提高創新能力和誠信作為公司使命，尼康自始至終都站在光學和技術創新的zui前沿

暗場觀察時不能使用油浸系或水浸系物鏡，而用干燥系物鏡中鏡口率在0.85以下的物鏡。假如使用鏡口率過大的物鏡時，除微粒子反射的光束以外的旁射光束也可進入物鏡前透鏡.就是這種放大率并不大的物鏡下，可以達到觀察亞微粒子的要求。具體操作如下：

　　1.安裝暗場聚光器檢查聚光器的光軸(并非晶體光軸而指幾何光學光軸)是否與顯微鏡的光路一致。聚光鏡用中心調節旋鈕合軸調整之后，圈錐光束的交點集中到標本平面上。

　　2.放標本放置標本時在聚光鏡前透鏡與載物片之間必須浸油。否則來自標本細節的反射光和衍射光束在載物玻片表面進行全反射。觀察結果趨于失敗。

　　3.調節聚光鏡焦點操縱光源會聚透鏡務使圓錐形光束的交點照射到標本平面上。

　　4.迭擇物鏡用于暗場觀察的物鏡中.油浸系或水浸系的物鏡不能使用。就是干燥系物鏡中也要挑選鏡率在0.85以下為好。如果物鏡鏡口率過大時，來自聚光鏡的部分直射光束進入物鏡前透鏡，從而干擾暗視野成像效應。如果使用油浸系物鏡觀察時，必須調節物鏡內裝孔徑光欄。

　　5.光派的選擇暗場顯微鏡中光能損失太大。因此必須選擇光強zui大的光源，才能取得較好效果。尤其以超聚光鏡觀察膠體微粒運動時，光強愈大愈好.

　　6.浸油的方法聚光鏡與載玻片間浸油時特別注意是否有氣泡。氣泡可招致暗視野觀察效果的*破壞。