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精子頂體形態花生凝集素熒光標記(PNA-FITC)染色試劑盒
閱讀:1004 發布時間:2015-5-12提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 46KB |
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資料圖片 | 下載次數 | 389次 | |
資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數 | 1004次 |
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主要用途
精子頂體形態花生凝集素熒光標記(PNA-FITC)染色試劑是一種旨在使用熒光素標記的花生凝集素和赫斯特33258雙重熒光染色技術,分析生理性反應性或病理性退行性頂體缺失的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細胞以及凍存精子細胞,以及受精時的精子細胞。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩定,熒光清晰。
技術背景
在男科學(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎信息。其中精子的活力(vitality)、運動能力(motility)、授精潛力(fertilizing potential)、膜結構或染色質結構完整性(integrity)、頂體反應(acrosomal reaction)功能的評價是精子分析的重要指標,也是決定人工受孕或體外授精(in vitro fertilization;IVF)的重要參數。其中頂體反應,是指當精子接近卵子實施授精時,精子頭部前半端的帽狀結構頂體,釋放出溶解酶,以便精子和卵子的膜融合。頂體反應測試是一項穩定的精子功能參數,可以用于預測受精成功率。因此頂體的結構完整性(intact)是評價的主要標志,也是不育癥和避孕藥物研究的對象。使用熒光素標記的花生凝集素(Isothiocyano-fluoresceinated peanut Arachis hypogaea agglutinin;PNA-FITC)和赫斯特33258(Hoechst 33258)雙重熒光染色技術,是精子頂體反應分析和授精效率評價的常用的方法。首先使用赫斯特33258染色,分析精子活力,基于赫斯特33258具有有限的膜通透性特點,受到活體精子細胞(包括游動性和非游動性精子)的排斥,而容易進入死亡精子細胞。其次使用熒光素標記的花生凝集素染料,與頂體外膜糖蛋白上的半乳糖殘基(β-D-galactosyl residue)的結合,顯示完整性(未反應性unreacted)頂體,同時可以應用于受精時的精卵反應。雙染的作用,以幫助區分生理性反應性頂體缺失(loss)或病理性退行性頂體缺失。通過常用的熒光顯微鏡(激發波長488nm,散發波長530nm)便可清晰觀察到綠色頂體狀態(status)。