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精子細胞氧化應激活性氧(ROS)高質熒光檢測試劑盒產品說明書

閱讀:1097          發布時間:2015-5-7
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主要用途


  精子細胞氧化應激活性氧(ROS)高質熒光檢測試劑是一種旨在使用透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯,在細胞氧化條件下,產生熒光,來定量檢測精子細胞內活性氧族的生成和增加而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適用于動物和人體精子細胞的活性氧族的檢測。可以被用于細胞凋亡、衰老、代謝和營養學,以及發育生物學(男性不育)等的研究。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩定,熒光清晰。


技術背景


超氧自由基陰離子(superoxide radical;O2-)、過氧化氫(hydrogen peroxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxyl radical;OH-)、過氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氫過氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-、過氧亞硝基陰離子(peroxynitrite anion;ONOO-次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、單線態氧氣(singlet oxygen)等細胞內活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的產生和增多,甚而導致諸如男性不育、冠心病、風濕性關節炎、腫瘤、退行性病變等各種病理狀況。其中精子細胞(spermatozoa)對于活性氧較為敏感:低濃度活性氧可以調節正常精子功能、精子獲能、頂體反應、精卵融合等;高濃度活性氧則影響精子細胞的質量和功能,因為精子細胞質膜含有大量不飽和脂肪酸,胞漿含有少量的祛除活性氧的相關酶蛋白,由此活性氧容易造成精子質膜的流動性和DNA完整性受到損害,精子運動能力降低,不能參與授精活動,終導致特發性不育癥(idiopathic infertility)。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯(6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydro fluorescein diacetate, acetyl esterCM-H2DCFDA)是取代二氯二氫熒光素二乙酯(2′,7′-dichlorodihydro fluorescin diacetateDCFH-DA)的升級產品,一種*自由通過細胞膜,并在細胞內長期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被過氧化氫、過氧化基、過氧亞硝基陰離子等氧化,便產生熒光。據此測定精子細胞內活性氧族的濃度。

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