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DMEM/F12培養(yǎng)基基本成分和保存

無機(jī)鹽；培養(yǎng)液中無機(jī)鹽的主要功能是幫助細(xì)胞維持滲透壓平衡。此外，通過提供鈉，鉀和鈣離子，幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素, 細(xì)胞通常可耐受260mOsm/kg ～320 mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動(dòng)。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會(huì)明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES 時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。

緩沖系統(tǒng)；大多數(shù)細(xì)胞所需pH值 在 7.2 - 7.4。但是，細(xì)胞培養(yǎng)zui適pH 值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH值 (7.4 - 7.7), 而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH 值(7.0 - 7.4)。
由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2 體系進(jìn)行緩沖，因此，氣相中的CO2 濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5％，培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為1.97g/L；如果CO2 濃度維持在10％，培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為3.95g/L。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES 是一種非離子緩沖液，在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用，以抵消因額外加入HEPES 引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下，細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH 指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。

碳水化合物；碳水化合物是細(xì)胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。

維生素；在細(xì)胞培養(yǎng)中，盡管血清是維生素重要來源，但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細(xì)胞系生長。

液體培養(yǎng)基；應(yīng)于4℃冰箱避光保存，實(shí)驗(yàn)前放入37℃預(yù)熱。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為12 個(gè)月。液體培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長而慢慢分解。如果細(xì)胞生長不良，可以再添加適量L-谷氨酰胺。
干粉培養(yǎng)基保存：
4℃冰箱避光保存，有效期36 個(gè)月。

相關(guān)產(chǎn)品；

DMEM高糖，C11995500BT，含L-谷氨酰胺和丙酮酸鈉。

DMEM高糖，C12430500BT，含L-谷氨酰胺和HEPES，不含丙酮酸鈉。

DMEM低糖，C11885500BT，含L-谷氨酰胺和丙酮酸鈉。

RPMI164 ，C11875500BT，含L-谷氨酰胺。

DMEM/F12，C11330500BT，含L-谷氨酰胺和HEPES。

F 12，C11765500BT，NUTRIENT MIX, HAMS，含L-谷氨酰胺。

MEM EARLES，C11095500BT，含L-谷氨酰胺。

MED 199 EARLES，C11150500BT，含L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。

另有Hyclone液體培養(yǎng)基，GIBCO干粉培養(yǎng)基，常備現(xiàn)貨，*，當(dāng)天發(fā)貨。

Trizol試劑 Invitrogen 100ml 200ml          蛋白酶K MercK    100mg

潮霉素B Roche   10843555001 20ml            G418 Life Invitrogen 11811-023 1g

G418 Life Invitrogen 11811-031 5g          瓊脂糖 西班牙原裝 100g

脂質(zhì)體2000 原裝 GIBCO 11668-027原裝 0.75ml 1.5ml

脂質(zhì)體3000 原裝GIBCO L3000-015 原裝1.5ML