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(一)操作室厭氧環境形成
1)按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內放入兩個五毒塑料袋。
2)混合氣瓶、氮氣瓶輸入壓力調整,調節減壓閥,使輸入壓力為0.1Mpa
3)打開設備后配,電源開關后,按控制牌上的總電源鍵,使設備通電。
4)操作室放入1000g鈀粒(密封)和500g干燥劑,并放入美蘭指示條。
5)關緊取樣室內外門,并抽真空校驗。(按控制面牌上真空泵鍵,按一下開,再按一下關)
6)操作室內*次置換(氮氣置換):
(1)先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一個插入塑料袋。
(2)接通氮氣進氣路,打開操作室氮氣控制閥,使兩只塑料袋充足氮氣后,關閉電磁閥,然后扎緊袋口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
(4)把塑料袋內氮氣漸漸的放于操作室內,至全部防除
7)操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次沖氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關閉排氣。
8)操作室第三次置換(混合氣體置換) (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%)
(1)調換氣路打開操作室混合氣閥進氣,沖氣時取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關閉排氣。
(2)混合氣充滿塑料袋后,關閉電磁閥,并打開混合氣限流閥,使混合氣經過穩流器、流量計、調整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。
(3)把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。
(4)通過三次換氣后,操作室內氣體含氧量已處于極為量狀態
9)操作室內打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,并在厭氧指示條反應區上滴一點潔凈水,1-2小時后,觀察其變色情況,反應部分深藍色變為淺藍為操作室內達到厭氧環境。
注:1指示條可反復使用,2 不可接觸蘭色反應區3包春在密封管內,防止在干燥處。10紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理,滅菌時間自定。
(二)菌種的置入和培養
1)檢查取樣室內門并關緊之。
2)打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外們。
3)取樣室充氮置換三次過程,先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后打開取樣室氧氣閥進氣,使指針回復零位,關掉閥。取樣室充氮置換三次過程結束。
4)如選定真空度較低就需要增加置換的次數。
5)取樣室外門開啟、關緊后,再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗。
6)厭氧培養箱需要長期連續使用的條件
(1)每天在操作室內放入美蘭指示條觀察,如不能正常就必須重新換氣。
(2)要長期連續輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結合通過催化吸收,保證了室內厭氧狀態,補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
(3).連續培養運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。(換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內,干燥2-3小時可使其復原)
7)接種棒滅菌器的應用:
(1)隨時用鎳烙電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。
(2)熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉熔蠟。
8)操作室理的培養箱理的培養箱內的溫度可任意選擇和控制。
(三)注意事項
1.儀表盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方。
2.開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。
3.培養物放入必須是在操作室內達到厭氧環境后放入。
4.如發生故障(停氣等原因)操作室內仍可保持12小時厭氧狀態。(超過12小時則根據需要把培養物取出另作處理)。
5.經常注意氣路有無漏氣現象。
6.調換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體
7.真空泵按要求使用,定期檢查加油。
8.停止使用,關閉總電源鍵,及設備后部的電源開關
(四)常見故障及處理
現象 | 原理 | 處理 |
1、無電源 | 1、插頭未插或短線 | 1、插好插頭 |
2、熔斷器開路 | 2、更換同型號熔絲管 | |
3、電源開關壞 | 3、更換電源開關 | |
2、培養箱不開蓋 | 1、設定溫度低 | 1、調整設定溫度 |
2、探頭壞 | 2、更探頭 | |
3、操作室、取樣室漏氣 | 1、密封不好 | 1、用肥皂水校漏后用704密封 |
2、年久橡皮圈老化 | 2、更換橡皮圈 | |
4、氣路不通 | 1、氣閥壞 | 1、更換氣閥 |
2、皮管漏氣或脫落 | 2、更換皮管 | |
3、氣瓶氣用完 | 3、更換氣體 | |
5、燈不亮 | 1、起輝器或燈不亮 | 1、更換起輝器或燈管 |
2、整流器燒壞 | 2、更換整流器 |