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1．離心（Centrifuge）：高速離心（10,000rpm）20-30秒，或低速離心（2,000rpm）5分鐘。2．溶解（Reconstitution）：用去離子水或其它緩沖液（根據說明書要求進行選擇）溶解至說明書要求的濃度（一般為0.1-1.0mg/ml）。溶解時不可振蕩，避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活，可加入適當的溶劑輕搖并靜置一段時間，待細胞因子*溶解后使用。溶劑的選擇：1）要求用去離子水溶解的產品，務必不可用鹽溶液，避免過高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出；2）要求用鹽溶液溶解的產品，請
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PeproTech公司的重組細胞因子產品經過了十分嚴格的生產、純化及質檢過程，保證其在投放市場之前，達到如下要求：1.真實性：重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析；必要時應用SDS-PAGE,RP-HPLC和質譜（MS）檢測其真實性。2.純度：應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。3.生物活性：進行相應的體外（invitro）或體內（invivo）活性檢測。4.蛋白含量：通過紫外光譜分析，SDS-PAGE電泳檢測；必要時應用HPLC定量標準蛋白溶液。5.內毒素：kinetic
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福爾馬林固定時，組織中的許多氨基酸殘基在分子內或分子間形成了醛鍵，使得不少抗原決定簇被封閉。同時，由于甲醛的聚合作用，使蛋白質分子間相互交聯形成大分子網絡，也導致了抗原決定簇被掩蓋，這就使得相當部分的抗原不能與抗體很好是進行反應。因此，抗原修復也是影響免疫組化染色結果的基本因素。抗原修復（Antigenretrieval，AR）技術，建立在Fraenkel-conrat等人[1]一系列生物化學研究，經1991年shi等人[2]發展。抗原修復是指石蠟、冰凍、火棉膠、塑料切片免疫組織化學（IHC）前
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RNA干擾（RNAinterference，RNAi）是正常生物體內抑制特定基因表達的一種現象，它是指當細胞中導入與內源性mRNA編碼區同源的雙鏈RNA（doublestrandedRNA，dsRNA）時，該mRNA發生降解而導致基因表達沉默的現象，這種現象發生在轉錄后水平，又稱為轉錄后基因沉默（post-transcriptionalgenesilencing，PTGS）。外源dsRNA進入細胞后產生的小分子干擾RNA（smallinterferingRNA,siRNA）的反義鏈和多種核酸酶形
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細胞凋亡中,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端，從而可進行凋亡細胞的檢測，這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法（terminal-deoxynucleotidyltransferasemediatednickendlabeling,TUNEL）。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂，因而沒有3'-OH
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細胞凋亡時主要的生化特征是其染色質發生濃縮,染色質DNA在核小體單位之間的連接處斷裂,形成50~300kbp長的DNA大片段,或180~200bp整數倍的寡核苷酸片段,在凝膠電泳上表現為梯形電泳圖譜（DNAladder）。細胞經處理后，采用常規方法分離提純DNA，進行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色，在凋亡細胞群中可觀察到典型的DNAladder。如果細胞量很少，還可在分離提純DNA后，用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）使DNA標記，然后進行電泳和放射自顯影，觀察凋亡細胞中DNAlad
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線粒體在細胞凋亡的過程中起著樞紐作用，多種細胞凋亡刺激因子均可誘導不同的細胞發生凋亡，而線粒體跨膜電位的下降，被認為是細胞凋亡級聯反應過程中zui早發生的事件，它發生在細胞核凋亡特征（染色質濃縮、DNA斷裂）出現之前，一旦線粒體DYmt崩潰，則細胞凋亡不可逆轉。線粒體跨膜電位的存在，使一些親脂性陽離子熒光染料如Rhodamine123、3，3-Dihexyloxacarbocyanineiodide[DiOC6（3）]、Tetrechloro-tetraethylbenzimidazolcarb
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磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine,PS）正常位于細胞膜的內側，但在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環境中（圖3）。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白，能與PS高親和力特異性結合。將Annexin-V進行熒光素（FITC、PE）或biotin標記，以標記了的Annexin-V作為熒光探針，利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。碘化丙啶（propidineiodide,PI）是一種核酸染料，它不能
