聯系電話
上海北諾生物科技有限公司
中級會員·13年
- 聯系人：
- 周經理 劉經理
- 電話：
- 021-57730393
- 手機：
- 15800960770
- 傳真：
- 86-021-61496710
- 地址：
- 上海市徐匯區宜山路520號中華門大廈18樓D座
- 個性化：
- www.bnbiotech.com
掃一掃訪問手機商鋪
質粒抽提過程中有很多步驟會影響zui后的產量和質量，那么如何評估質粒DNA的產量和質量呢？ 目前使用分光光度法定量質粒DNA和通過瓊脂糖凝膠電泳進行質粒DNA產率和質量的分析是兩種zui常用的方法。 溶液中的核酸濃度可通過260 nm的吸光度方便地進行計算。A260的數值處于0.1至1.0之間時測量結果具有良好的重復性，但當A260數值小于0.1或大于1.0的時候，結果的可重復性將顯著下降。而且，3.0以上的讀值是無法使用的，它可能會潛在導致對DNA質量的低估。因此，為了獲得可靠的DNA分光光度定量結果，A260的讀值需要處于0.1至1.0之間。當檢測小量DNA時，使用瓊脂糖凝膠電泳進行的定量分析可能更為可靠。 造成較低的產率和質量的可能因素有很多。為了確定存在問題的環節，可于每一純化步驟都保留一小部分樣品，并通過瓊脂糖凝膠電泳進行分析。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
如各個實驗方案和下列表格中所示，從澄清裂解液（樣本1）、流出液（樣本2）、QC洗滌緩沖液的混合組分（樣本3）和QF/QN緩沖液洗脫產物（樣本4）中各取出部分樣品。使用1倍體積的異丙醇沉淀核酸，并使用70%的乙醇洗滌該沉淀，充分蒸干后重懸于10 μl pH8.0的TE緩沖液中。 表一 瓊脂糖凝膠分析所需樣本體積
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
在1%的瓊脂糖凝膠*中，對于各個質粒純化步驟中的對應樣品各加入2 μl進行電泳。 以上信息來源于： http://www.qiagen。。ｃｏｍ/cn/resources/technologies/plasmid-resource-center/reliability%20of%20dna%20quantification%20by%20spectrophotometry/ http://www.qiagen。。ｃｏｍ/cn/resources/technologies/plasmid-resource-center/agarose%20gel%20analysis%20of%20the%20purification%20procedure/ | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
