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標簽： 流式 細胞儀
流式細胞儀（flow cytometer）是一種能夠探測和計數以單細胞液體流形式穿過激光束的細胞檢測裝置，由于在檢測中使用的細胞標志示蹤物質為熒光標記物，因此，用來分離、鑒定細胞的流式細胞儀有被稱為熒光激活細胞分類儀，是分離和鑒定細胞群及亞群的一種強而有力的應用工具。
實驗方法
- 流式細胞儀
| 實驗方法原理 | 流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。*，是儀器前階段，包括試劑的準備，細胞制備、細胞的熒光染色；第二，是流式細胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結果分析階段。 |
|---|---|
| 實驗材料 | 淋巴細胞 外周血的白細胞 |
| 試劑、試劑盒 | FACS緩沖液 PBS 疊氮鈉溶液 儀器緩沖液 FACS清潔液 FACS洗凈液 |
| 儀器、耗材 | 流式細胞儀 |
| 實驗步驟 | 一、細胞和試劑的準備
4. FACS緩沖液： 1×PBS 950 ml FCS 40 ml 10%疊氮鈉溶液 10 ml
1. 單細胞懸液的制備：將1×105~1×107的細胞放入1.5 m l離心管中3000 r/min 離心5分鐘，棄上清；加入FACS緩沖液100 μl 懸浮細胞。
b.abti-CD3（2 ng/ml）檢測結果
c.abti-CD3（10 ng/ml）檢測結果
CD4及CD8細胞點狀二維圖結果
不同的熒光物要求選擇不同的激發波長，參見下表
（2）細胞的吸入：將裝有細胞的FACS測定管放置到機器吸管孔處。 先預檢測樣品，然后進行實際檢測。可根據細胞的濃度選擇測定的速度（低、中或高）。所有的數據將自動存入微機。
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| 注意事項 | 1. 減少非特異熒光染色 （1）細胞的活性和狀態：流式細胞儀不但可探測細胞表面的熒光，也可探測細胞內的熒光。因此，如果要檢測細胞表面的分子，一定要保證細胞的活性，還應盡可能保持細胞靜止，通常在4度進行操作。否則，熒光抗體進入死細胞內，會產生非特異結果。
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