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超聲波破碎的適用范圍
閱讀:3240 發布時間:2017-5-23超聲波破碎的適用范圍
超聲波破碎是很激烈的破碎辦法,適用于少數微生物的破碎。
普通桿菌比球菌易破碎,G-細菌比G+細菌易破碎,對酵母菌的效果較差。
但超聲波發生的化學自在基團能使某些敏理性活性物質失活。
超聲波破碎的無效能量應用率極低
由于對冷卻的要求相當苛刻,所以不易縮小,但在實驗室小規模細胞破碎中常用。超聲波細胞破碎儀
超聲波細胞破碎儀運用留意事項: 1 、切記空載(一定要將超聲變幅桿拔出樣品后才干開機,) 2、變幅桿(超聲探頭)入水深度: 1.5Cm 左右,液面高度有30mm以上,探頭要居中,不要貼壁。超聲波是垂直縱波,插入太深不容易構成對流,影響破碎效率。 3、超聲參數設置:設置鍵好儀器任務參數(詳細設置見闡明書或來電征詢),關于對溫度要求比擬敏感的樣品(比方細菌)一般里面采用冰浴,實踐溫度一定是低于25度,蛋白核酸肯定不會變性。 1) 工夫:超聲時間每次不要超越5秒 ,間隙時間應大于或等于超聲時間,以便于熱量分發。時間設定應以超聲時間短,超聲次數多準繩,可延伸超聲機子以及探頭的壽命。 2) 超聲功率: 不宜太大,以免樣品飛濺或起泡沫,如小于10ml樣品容量,功率應在200w以內,選用2mm超聲探頭,另將面板前面的變幅桿選擇開關打到相應擋;10-200ml樣品容量的功率在200-400w,選用6mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應擋;200ml以上的樣品容量功率在300-600w之間,選用10mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應擋;(2MM的小探頭功率嚴禁超過350W) 3) 容器選擇:有多少的樣品就選多大的燒杯,這樣也是有利樣品在超聲中對流,進步破碎效率。例如;20ML的處置量用20ML的燒杯。 如100ml大腸桿菌樣品設置參數: 超聲5秒 /間隙5秒 次數70次(總時間為10分鐘)。功率300W(僅供參考) 500ML左右的量,功率開到500W-800W左右 4、若樣品放在1.5ml的EP管里請一定要將EP管固定好,以防冰浴消融后液面下降招致空載 5、日常保養:用完后用酒精擦洗探頭或用清水停止超聲. 超聲波細胞破碎儀
選擇破碎方法的根據:
細胞處理量;
細胞壁強度和構造(高聚物交聯水平、品種和壁厚度);
目的產物對破碎條件的敏感性;
破碎程度;
目標產物的選擇性釋放.