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水溶性聚合物分析尺寸排阻色譜柱的選型
水溶性聚合物的研發和質控中,樣品的分子量與分子量分布是一個重要指標。尺寸排阻色譜(SEC)作為分子量與分子量分布的測定法,具有簡便、精密度高等優點,因此得到廣泛使用。東曹的TSKgel 水溶性SEC色譜柱采用了以親水性乙烯基聚合物為基材的高親水性填料,非常適合用于水溶性聚合物的分離。該系列包括多款分子量排阻范圍、粒徑、層析柱尺寸不同級別的色譜柱,可適用于多種分析用途。
這里,小編將和大家聊一聊關于水溶性聚合物分析用SEC色譜柱的選擇。
●色譜柱的選擇
(1) 快速分析用半微量色譜柱
TSKgel SuperMultiporePW系列是分離大多數水溶性合成聚合物及多糖類物質的優選色譜柱。該系列色譜柱裝填有小粒徑、細孔多分散型填料的半微型色譜柱(6.0 mmI.D.×15 cm),可實現超高速、高效分離、節省溶劑。此類色譜柱的校正曲線線性優異、沒有拐點,避免了色譜圖中出現不正常的凹凸現象。
TSKgel SuperOligoPW色譜柱適用于中性低聚物的快速、高效分離。僅需一半的分析時間便可達到與30cm的常規色譜柱相同的分辨率。
(2) 通用色譜柱
TSKgel PWXL系列是7.8 mmI.D.×30cm規格的通用高性能色譜柱。該系列包含5種不同分子量測定范圍的色譜柱及混合型色譜柱,可以將適合樣品分子量和分子量分布的不同級別的色譜柱串聯起來進行測定。混合型TSKgel GMPWXL色譜柱也適合用于測定分子量未知的樣品,或分子量分布較廣的樣品。
專用色譜柱TSKgel G-Oligo-PW則適用于分析中性低聚物。
(3) 超高分子分析用色譜柱
樣品在使用大粒徑填料時,分子鏈不易斷裂,因此超高分子分析色譜柱適用于準確求出分子量超大樣品的分子量分布。TSKgel PW系列色譜柱采用的填料粒徑大于PWXL系列,適用于測定超高分子、高粘性聚合物。同時我們還提供制備柱。
(4) 陽離子聚合物用色譜柱
TSKgel PWXL-CP系列色譜柱適合分析陽離子聚合物。陽離子聚合物柱在填料表面引入了陽離子官能團,可以通過低鹽濃度的洗脫液抑制對陽離子性官能團的吸附能力。
TSKgel PWXL-CP選用了與PWXL系列相同的填料,理論塔板數高,耐久性*。該系列產品包括3款分子量分離范圍級別不同的色譜柱,可以將適合樣品分子量和分子量分布的不同級別的色譜柱串聯起來測定。
▼ TSKgel 水溶性SEC色譜柱的選擇方法
● 洗脫條件的選擇
水溶性SEC應根據樣品的性質(溶解性、穩定性、離子性、疏水性等)來選擇洗脫條件。
(1) 中性樣品、酸性樣品
TSKgel水溶性SEC色譜柱的填料表面僅有一部分酸性基團,酸性樣品和中性樣品可以采用低鹽濃度的中性鹽洗脫液(0.1 mol/L NaNO3等)清洗,從而抑制填料與樣品酸性基團之間的斥力,制得正確的色譜圖。
中性樣品可以將水作為洗脫液,但由于樣品溶液中含有離子,填料表面的電荷狀態發生變化可能導致色譜圖不具有重現性,因此建議使用中性鹽洗脫液。
(2) 堿性樣品
為抑制填料與樣品的離子相互作用,堿性樣品需使用鹽濃度較高的洗脫液(醋酸鈉緩沖溶液等)和添加有機胺的洗脫液。TSKgel PWXL-CP色譜柱可以在低鹽濃度的洗脫條件下進行測定。
(3) 疏水性樣品
為抑制填料月樣品間的疏水作用,測定高疏水性樣品時,需在洗脫液中添加甲醇和乙腈等極性有機溶劑。必須根據樣品的疏水性選擇合適的有機溶劑濃度。另外,需要注意的是上述TSKgel水溶性SEC色譜柱內可添加的有機溶劑濃度上限為50%。
如果是必須添加50%以上濃度的有機溶劑時,建議選用有機相的TSKgel α系列、TSKgel SuperAW系列色譜柱。
▼ 典型的洗脫液成分