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臺式電動離心機的使用步驟和使用的注意事項

閱讀:1519        發布時間:2015-11-12
       前者是沉降速度法,應用該法時液體介質的zui大密度要小于樣品中zui小顆粒的密度,離心時選用高轉速和短時間;后者是沉降平衡法,應用該法時液體介質的zui大密度要大于樣品中zui小顆粒的密度,離心時選用較低轉速和較長時間。實際操作有幾種形式:

       1.差速離心這種方法是選擇不同轉速的離心,分別分離各個不同組分。例如先用低速沉降大顆粒和上清液,在高速離心上清沉降中等顆粒,zui后超速離心上清沉降小顆粒。采用逐級提高離心力分離上情液的方法,把不同大小的顆粒分開。
       這種方法比較簡單,方便。分離的組份沉到管底,因此可以迅速濃縮所要的組份,減少體積。但回收率和純度是有矛盾的,要提高回收率,勢必提高轉速或延長離心時間,這樣大小相近的顆粒也會沉到管底。因此該法多用于粗提純或初步濃縮樣品。

       2.速度區帶(或速度梯度)離心本法是將樣品放在一個連續的密度梯度液體上,通過離心,大顆粒沉降快,小顆粒沉降慢。經過一段時間,相同的顆粒就在同一深度形成一條帶子,因此把各種組份分開來。它適用于分離密度相同、而大小不同的物質,如不同的蛋白質組份密度都差不多,但分子量不一樣,用本法很容易將其分開。但對密度不同、大小類似的物質則不易分離。蔗糖梯度是一種常用的介質。用不同濃度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度,用于梯度離心。再分別進行收集處于不同區帶里的各個組份。 

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