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概述ELISA試劑盒質(zhì)量管理

時(shí)間：2013-9-26閱讀：284

Elisa試劑盒簡(jiǎn)單概述：
●ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測(cè)，既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。ELISA試劑盒的影響因素較多，加強(qiáng)質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。

分析前質(zhì)控
●人員培訓(xùn) 實(shí)驗(yàn)是***作的，因此檢驗(yàn)人員需經(jīng)過(guò)培訓(xùn)，熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識(shí)：
◎檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理（ELISA試劑盒原理）；
◎臨床意義；
◎熟悉檢測(cè)技巧，了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn)；
◎熟悉檢測(cè)試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；
◎ 熟悉檢測(cè)儀器的原理及性能；掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識(shí)。
◎某些特殊項(xiàng)目的檢測(cè)如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門(mén)組織的專門(mén)培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。

分析前質(zhì)控
1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)發(fā)展為ELISA試劑盒技術(shù)。
特點(diǎn) ：在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"
酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì)，進(jìn)行信號(hào)放大；
有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過(guò)程；
靈敏度特異性相對(duì)較高。
局限性：只能檢測(cè)到ng水平
精密度差（批內(nèi)CV15-20%）；
線性范圍窄（一個(gè)數(shù)量級(jí)）；
存在"HD-HOOK"效應(yīng)。

ELISA試劑盒原理
●根據(jù)檢測(cè)目的和操作步驟不同有三種基本方法。
●雙抗體（原）夾心法檢測(cè)抗原（體）的常見(jiàn)方法，應(yīng)用針對(duì)抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測(cè)溶液中的抗原（適用于二價(jià)以上抗原,不能測(cè) 小分子半抗原）。
●間接法檢測(cè)抗體的方法，利用酶標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）檢測(cè)已與固相抗原結(jié)合的抗體。
●競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗原或小分子半抗原、抗體，以測(cè)抗原為例，使待測(cè)抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合，結(jié)果如待測(cè)抗原含量越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關(guān)。