INS試劑盒,人胰島素ELISA試劑盒說明書,慧穎生物采用科技,純進口試劑,為保證客戶利益,防止市面上假冒偽劣,產品包裝統一更新,誠招全國代理商。
產品名稱:INS試劑盒,人胰島素ELISA試劑盒說明書
檢測方法:ELISA
檢測類型:酶免免疫夾心法
檢測范圍:見說明書靈敏度:見說明書(以隨貨英文說明書為主)
檢測目標:人
檢測時間:小時
樣品形式:血清/血漿/細胞培養上清液/其它體液
保存方式:短期4℃/長期-20℃
應用范圍:科研用檢測試劑
產品特點:重復性好,特異性強,性價比高,線性好;操作簡單,精確度高;售前售后完善,隨時來實驗室現場觀看,訂試劑盒免費代測。
注明: 本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷
檢測原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被胰島素(INS)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0 的S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白;預處理后的樣本無需稀釋,直接取50μL 加樣即可。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20 稀釋,即1 份的20×洗滌緩
沖液加19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min 后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5 次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5 次。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 待測樣本孔先加生物素10μL,再加待測樣本50μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5 次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min 內,在450nm 波長處測定各孔的OD 值。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD 值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R 值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 mIU/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 個月
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