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菌種需有專人保管,管理人員應具有較強的責任心,并具有一定的微生物專業知識和技術水平。
菌種應保存在冰箱內,保存菌種的冰箱不得放置食品及易揮發性藥品。
按期有專人根據操作規程進行傳代接種。
保存菌種應定期檢查,一般每年檢查1—2次,發現染菌變異等現象時,報告科室主任研究處理。
菌種的來源、復壯、使用和鑒定等均應做好詳細記錄。
試驗菌種不得任意帶出菌種保存實驗室。外單位索取菌種時,應包裝嚴密,妥善保存。
菌種檢查和復壯
經過長期保藏和傳代的菌種,由于種種原因易發生衰退、變異或死亡,因此各類菌種在保藏期間必須定期檢查,發現變異或衰退,應及時給予恢復。
1.定期檢查
在一定間隔時間需重新復活、分離、純化、鑒定再保藏。
檢查項目:菌落形態、革蘭染色、顯微鏡下菌體形態、生化特性及血清學檢查。
2. 防止菌落的衰退
控制傳代次數。
創造適宜的培養條件。
用不同類型的細胞進行傳代。
采用有效的保藏方法。
菌種的傳代
將微生物接種至一新鮮培養基上/內,每萌發一次即為一代——USP
菌種的傳代次數(自原始的菌種凍干粉起)不得超過5代——GMP/CP2005
菌種保藏
菌種保藏方法一般分四個階段
(1)挑選特征典型的純菌菌落
(2)能產生孢子或芽孢的微生物應用孢子或芽孢進行保存
(3)選擇zui適宜的方法保藏
(4)定期對保藏菌種進行檢查
常用的保藏方法
瓊脂斜面低溫保藏法
液體石蠟覆蓋保藏法
半固體瓊脂保藏法
甘油冷凍管保藏法
保藏芽孢液
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