乙酸-DTT消化液公司正在銷售的產(chǎn)品：黃素單核苷酸(FMN)試劑盒Anti-KLF1 Antibody羊抗人球蛋白A
黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)試劑盒Anti-KLF10/11 Antibody兔抗人k-鏈
花生四烯酸(AA)試劑盒Anti-KLF11 Antibody
前列腺素E1(PGE1)試劑盒Anti-KLF12 Antibody
脂氧素A4(LXA4)試劑盒Anti-KLF7 Anti

產(chǎn)品分類：染色其他

儲(chǔ)存條件：4℃,6個(gè)月

用途：用于婦科標(biāo)本或非婦科標(biāo)本(穿刺液、尿液、痰液、胸膜腔積液、滲出液及呼吸道、胃腸、乳腺等分泌物)的前期均質(zhì)化處理。特別用于標(biāo)本因血或粘液過(guò)多的情況下，推薦選擇本消化液。

注意事項(xiàng)：主要組成成份：冰乙酸，二硫蘇糖醇。有腐蝕性，注意做好防護(hù)。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

大腸埃希氏桿菌FAM129B蛋白抗體Human CAMSAP1 (Calmodulin-regulated spectrin-associated protein 1) ELISA KIT牛白介10(IL-10)免疫試劑盒

蟻巢傘屬微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human CAB39 (Calcium-binding protein 39) ELISA KIT牛白介1(IL-1)免疫試劑盒

秦氏蜜環(huán)菌FAM50A蛋白抗體Human BSDC1 (BSD domain-containing protein 1) ELISA KIT牛γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

紅緣擬層孔菌FAM113A蛋白抗體Human CASQ1 (Calsequestrin-1) ELISA KIT牛γ基丁(GABA)免疫試劑盒

FAM150A蛋白抗體Human C1GALT1C1 (C1GALT1-specific chaperone 1) ELISA KIT牛β-乳球蛋白(β-LG)(過(guò)敏原Bosd5)(LGB)免疫試劑盒

聚生殼菌FRMD8蛋白抗體Human NACC2 (Nucleus accumbens-associated protein 2) ELISA KIT牛β羥基丁脫氫(β-HBDH)免疫試劑盒

葡萄座腔菌FGFR1癌基因伴侶蛋白抗體Human P2RY12(P2Y purinoceptor 12) ELISA Kit牛β羥丁(βOHB)免疫試劑盒

多鏈霉菌FAM家族蛋白40A抗體Human CADPS2 (Calcium-dependent secretion activator 2) ELISA KIT牛β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒

黃曲霉FAM55D蛋白抗體Human CPPED1 (Serine/threonine-protein phosphatase CPPED1) ELISA KIT牛β干擾(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒

葡萄芽假絲酵母組織激活過(guò)氧化活化增生受體γ蛋白抗體Human CADPS (Calcium-dependent secretion activator 1) ELISA KIT牛β-防御(β-Defensins)免疫試劑盒

葡紫紅菇FAM21C蛋白抗體Human BOK (Bcl-2-related ovarian killer protein) ELISA KIT牛α乳清蛋白(α-La)免疫試劑盒

光滑青霉FAM13C1蛋白抗體Human BRAP (BRCA1-associated protein) ELISA KIT牛α晶體B鏈(CRYAB)免疫試劑盒

大腸埃希氏桿菌FAM59B蛋白抗體Human BCAR3 (Breast cancer anti-estrogen resistance protein 3) ELISA KIT牛α干擾(IFN-α)免疫試劑盒

解淀粉芽孢桿菌FAM59A蛋白抗體Human BFSP1 (Filensin) ELISA KIT牛α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒

根癌土壤桿菌FAM160B1蛋白抗體Human BSCL2 (Seipin) ELISA KIT牛P物質(zhì)(SP)免疫試劑盒

擬枝孢鐮孢FAM161B蛋白抗體Human BRI3BP (BRI3-binding protein) ELISA KIT牛N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒

立枯絲核菌Rhizoctonia│solani 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)茄

Oriloxodonta鏈球菌Streptococcus oriloxodontae Shinozaki-Kuwahara et al. 2014 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥98.5%(GC)千層紙

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.6%10-羥基癸烯
乙酸-DTT消化液Human matrilysin,MAT ELISA Kit  人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶su規(guī)格： 48T

Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit  人螺旋肽規(guī)格： 48T

Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Kit  人溶mei體相關(guān)膜蛋白2規(guī)格： 48T

Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit  人軟骨糖蛋白39規(guī)格： 48T

Human Opacity-associated proteins,OPAs ELISA Kit  人不透光相關(guān)蛋白規(guī)格： 48T