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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/96樣 |
產品貨號 | AS632117 |
商品介紹：
測定意義： NADPase主要存在于植物組織中，是生物體內催化NADP+降解為NAD+的酶，與NADK一起調控NAD和NADP之間的平衡。 測定原理： NADPase能夠催化NADP+水解為NAD+和無機磷的反應，通過測定無機磷的量來測定NADPase活性。 所需的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
抗促狀腺受體抗體(TRAb)英文名：TRAb ELISA Kit腺相關病5 VP1抗體包裝5MG
抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)英文名：α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit脂肪脫氫抗體包裝100g
抗Smith抗體(Sm)英文名：Sm ELISA Kit抗尿激1A抗體包裝25g
卷曲螺旋域結合蛋白80(CCDC80)英文名：CCDC80 ELISA Kit抗尿激受體1B抗體包裝5g
巨噬細胞移動因子(MIF)英文名：MIF ELISA Kit二磷腺苷核糖基化因子鳥核苷交換因子2抗體包裝1g
巨噬細胞移動抑制因子(MIF)英文名：MIF ELISA Kitα增強子結合蛋白1抗體包裝5g
巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)英文名：MIP-5 ELISA Kit脊髓小腦共濟失調10抗體包裝250mg
巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)英文名：MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA Kit蛋白激A錨定蛋白7抗體包裝1g
巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)英文名：MIP-3α/CCL20 ELISA Kit腺苷三磷結合盒轉運體12抗體包裝5g
巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)英文名：MIP-2 ELISA Kit腺苷三磷結合盒轉運體9抗體包裝25g
巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)英文名：MIP-1δ/CCL15 ELISA Kit三磷腺苷結合盒轉運蛋白4抗體包裝5g
巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)英文名：MIP-1β/CCL4 ELISA Kit肌動蛋白結合蛋白LIM3抗體包裝100g
巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP1α)英文名：MIP1α ELISA Kit高爾基復合體相關蛋白1抗體包裝25g
巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)英文名：MDC/CCL22 ELISA Kit乙酰羧化1ACCα抗體包裝100mg
巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)英文名：M-CSF ELISA Kit腺核苷轉運蛋白1、2、3、4抗體包裝1g
磷化蛋白激B抗體促腎上腺皮質激(ACTH)L-685458是一種有效的淀粉樣β蛋白前體γ分泌抑制劑, IC50為17 nM,比作用于其他天冬酰蛋白選擇性高50-100倍。
NADP磷酸酶（NADPase）測試盒100管/96樣小單孢 3--5-多巴D2受體Elisa
ATP 熒光儀 3-溴-4-氧代-1-羧酸叔丁酯多功能蛋白聚糖Elisa
大腸埃希 3-溴-5-苯甲多環芳烴-DNA加合物Elisa
乳酒假絲酵母 3-溴-5-氟苯甲多聚ADP核糖聚合Elisa
南海區交替紅色桿 N,N-二甲基硫代氫酰基烷磺酸鈉多配體蛋白聚糖4Elisa
路氏腸桿 6-硝基-2-甲多效生長因子Elisa
枯草芽孢桿 環酸葉酯多形核白彈性蛋白Elisa
融粘帚霉 4-氟-3'-二苯多藥耐藥相關蛋白Elisa
F56（蘑菇） 4-甲氧基鄰苯二甲酸多藥耐藥相關蛋白1Elisa
黃薄芝 異丁酸乙基香蘭酯惡性腫瘤特異性生長因子Elisa
食苯芽胞桿 2-氮雜雙環[2.2.1]-5-庚烯-2-羧酸叔丁酯腭肺鼻上皮癌相關蛋白Elisa
大腸埃希 2-氨基-5-甲氧基苯甲酰兒茶 Elisa
肉色曲霉 四丁基兒茶抑Elisa
中溫富鹽 N-芐氧羰基乙二氧化Elisa
深褐褶 2--6-吡啶-3-二級組織趨化因子Elisa
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