詳細介紹
產(chǎn)品分類:微生物染色
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:酵母涂片染色
注意事項:主要由碘化鉀和1%碘組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
肝糖粒染色液 | 100ml | FS-R7059 |
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
球毛殼菌幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human MYH10(Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle) ELISA Kit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒
小孢根霉嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體Human NPYR2(Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit人乳糖凝集8(LGALS8)免疫試劑盒
人參土成對桿菌幾丁質(zhì)1抗體Human MAN1A1(Mannosidase Alpha Class 1A Member 1) ELISA Kit人乳脫氫A(LDHA)免疫試劑盒
假單胞菌屬白抗原CD97 alpha 抗體Human MMP-24(Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit人乳清磷核糖轉(zhuǎn)移(OPRT)免疫試劑盒
更新世肉桿菌緊密連接蛋白2抗體Human MANF(Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit人乳過氧化物(LPO)免疫試劑盒
淋病奈瑟菌緊密連接蛋白7抗體Human MAPK(Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit瘤抗原1(SAGE1)免疫試劑盒
海南油脂酵母2號染色體開放閱讀框53抗體Human MMP-25(Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit堿O-棕櫚酰基轉(zhuǎn)移1,肝亞型(CPT1A/CPT1)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌2號染色體開放閱讀框54抗體Human MMRN1(Multimerin 1) ELISA Kit堿免疫試劑盒
哈茨木霉2號染色體開放閱讀框56抗體Human KERA(KeRatocan) ELISA Kit堿脂酰轉(zhuǎn)移(CACT)免疫試劑盒
熱脫氮地芽孢桿菌熱脫氮亞種2號染色體開放閱讀框61抗體Human LZMg(Lysozyme G) ELISA Kit堿O -乙酰基轉(zhuǎn)移(CRAT/CAT1)免疫試劑盒
茯苓癌相關(guān)抗原抗體Human LAMA4(Laminin Alpha 4) ELISA Kit人溶血血小板活化因子(lyso-PAF)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌分裂周期相關(guān)蛋白4抗體Human LAT(Linker For Activation of T-cell) ELISA Kit人溶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)免疫試劑盒
新疆糖絲菌色b5抗體Human LACTβ(β-Lactamase) ELISA Kit人溶菌(LZM)免疫試劑盒
球孢白僵菌鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體Human LDL(Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人絨毛膜促性腺激(HCG)免疫試劑盒
禽腺病1號染色體開放閱讀框186抗體Human LCA/CD45(Leukocyte Common Antigen) ELISA Kit人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)免疫試劑盒
白布勒擔(dān)孢酵母CXC趨化因子16抗體Human LDHB(Lactate Dehydrogenase B) ELISA Kit人特異性蛋白B(PSPB)免疫試劑盒
異孢單頂孢Monacrosporium│heterosporum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCCAAT增強子結(jié)合蛋白δ試劑盒大黃-8-O-β-D-葡萄糖苷
海洋桿菌Pontibacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRCCAAT增強子結(jié)合蛋白α試劑盒酰
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRcAMP和cAMP抑制cGMP 3',5'循環(huán)磷二酯10A試劑盒丁香
肝糖粒染色液GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激mei規(guī)格: 48T
MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人單an氧化mei規(guī)格: 48T
cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit 人胞漿型磷脂meiA2規(guī)格: 48T
DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit 人二an氧化mei規(guī)格: 48T
COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧mei2規(guī)格: 48T