詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS632169 |
商品介紹:
測定意義: 植物酚類物質具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養價值和醫療保健作用而廣泛應用于化妝品、食品、醫藥等領域。 測定原理: 在堿性條件下,酚類物質將鎢鉬酸還原,產生藍色化合物,在760nm處有特征吸收峰,測760nm處的吸光值,即可得樣品總酚含量。 需自備的儀器和用品: 天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
叉頭框蛋白O3(FOXO3)英文名:FOXO3 ELISA Kit轉錄同源蛋白質CUX2抗體包裝1g
叉頭框蛋白M1(FOXM1)英文名:FOXM1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白146抗體包裝5g
叉頭框蛋白A2(FOXA2)英文名:FOXA2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白147抗體包裝1g
層粘連蛋白β1(LAMβ1)英文名:LAMβ1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白158抗體包裝250mg
層粘連蛋白α1(LAMα1)英文名:LAMα1 ELISA Kit鈣粘附蛋白-11抗體包裝100g
補體因子D(CFD)英文名:CFD ELISA Kit核仁蛋白C23抗體包裝25g
補體因子B(CFB)英文名:CFB ELISA Kit皮膚相互作用蛋白2抗體包裝5g
補體成分5a受體1(C5aR1)英文名:C5aR1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框149抗體包裝25g
補體成分5a(C5a)英文名:C5a ELISA Kit碳化合物激結構域蛋白質抗體包裝5g
補體成分5(C5)英文名:C5 ELISA Kit尾側型同源轉錄因子1抗體包裝1g
補體成分4b(C4b)英文名:C4b ELISA Kit補體C1qTNF8鏈多肽抗體包裝5g
補體成分4a(C4a)英文名:C4a ELISA Kit21號染色體開放閱讀框62抗體包裝1g
補體成分4(C4)英文名:C4 ELISA Kit磷化胞漿型磷脂A2抗體包裝5g
補體成分3(C3)英文名:C3 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框46抗體包裝1g
補體3a(C3a)英文名:C3a ELISA Kit20號染色體開放閱讀框103抗體包裝25g
鯊魚弧菌Vibrio│carchariae 質量規格:HPLC>98%,標準品游離雌三試劑盒異鼠李-3-O-半乳糖苷;Isorha
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質量規格:>97%,BR游離β絨毛膜促性腺激試劑盒茵芋堿;Skimmianine
沙門氏菌Salmonella│sp. 質量規格:含量測定幽門螺旋菌抗體試劑盒一枝蒿庚;Bullatine G;so
植物總酚(Tp)測試盒50管/24樣釀酒酵母 福霉SApat-1Elisa
松針散斑殼 3,4-二溴吡啶克氏錐蟲Elisa
枯草芽孢桿 (R)-2-甲基吡咯烷鹽酸鹽溶Elisa
深紅酵母 4-甲基-5-甲氧基-1,2,4-三唑啉-3-酮凋亡激活因子Elisa
微白類諾氏 (1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲支鏈氨基酸Elisa
凱斯特鞘氨單胞 4-氟間苯二肝糖原Elisa
尖角凸臍蠕孢 鹽酸沙格雷酯PPP1CaElisa
薔薇生鏈格孢 2-甲基硫代酰幽門螺桿IgG抗體Elisa
假單胞屬 4-芐基-2-嗎琳羧酸鹽酸鹽蛋白精甲基轉移1Elisa
Microterricola viridarii (S)-N-Boc-2-羥甲基嗎啉分泌型卷曲相關蛋白1Elisa
蘇云金芽孢桿 (R)-N-Boc-2-羥甲基嗎啉Dickkopf 3Elisa
膠孢 4-Boc-2-羥甲基嗎啉CTXIIIElisa
孢吸水鏈霉昆明變種 3--4-苯5α-雙氫睪酮 Elisa
pYES3/CT 3--6-噠性別決定區Y蛋白Elisa
青霉(加詞待譯) 4-羥基環己酮腎綜合征出血熱病抗體Elisa