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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-06-14 15:13:22瀏覽次數(shù)：209
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | AS632111 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 檢測(cè)方法 | 紫外分光光度法 |
商品介紹：
測(cè)定意義 ADH是生物體內(nèi)短鏈醇代謝的關(guān)鍵酶，在很多生理過(guò)程中起著重要作用。哺乳動(dòng)物ADH主要在肝臟生成，肝臟損傷導(dǎo)致ADH釋放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否異常。 測(cè)定原理 在乙醛存在下，ADH催化NADH氧化生成NAD+；在340nm處測(cè)定NADH的減少量，可計(jì)算出ADH活性。 實(shí)驗(yàn)中所需儀器及用品 研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1ml石英比色皿、可調(diào)式移液器和雙蒸水。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測(cè)方法 | 紫外分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號(hào) | AS632111 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 NADH的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A3和A4。△A測(cè)定管=A3-A4。
注意：空白管只需測(cè)定一次。
三碘狀腺原(T3)英文名：T3 ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移4抗體包裝100g
乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)英文名：LF/LTF ELISA KitAKIRIN2蛋白抗體包裝25g
乳脫氫(LDH)英文名：LDH ELISA KitADP核糖基化樣因子8B抗體包裝5g
溶菌(LZM)英文名：LZM ELISA Kit三磷腺苷家族蛋白2抗體包裝1g
絨毛膜促性腺激β(β-CG)英文名：β-CG ELISA KitAKIRIN1蛋白抗體包裝5g
絨毛膜促性腺激(CG)英文名：CG ELISA Kit錨定蛋白樣蛋白1抗體包裝1g
妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)英文名：PAPP-A ELISA Kit腺苷激2抗體包裝5g
熱休克因子1(HSF1)英文名：HSF1 ELISA Kit頂體前體蛋白抗體包裝1g
熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)英文名：HSP gp96 ELISA Kit黑色瘤缺失樣蛋白1抗體包裝5g
熱休克蛋白90(HSP-90)英文名：HSP-90 ELISA Kit未知糖基化轉(zhuǎn)移AER61抗體包裝100g
熱休克蛋白70(HSP-70)英文名：HSP-70 ELISA Kit鐵蛋白Fe65抗體包裝25g
熱休克蛋白60(Hsp-60)英文名：Hsp-60 ELISA Kit抑癌基因ras同源家族1抗體包裝5g
熱休克蛋白40(Hsp-40)英文名：Hsp-40 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體包裝100g
熱休克蛋白27(HSP-27)英文名：HSP-27 ELISA Kit心鈉抗體包裝25g
熱休克蛋白20(Hsp-20)英文名：Hsp-20 ELISA Kit酰tRNA合成2抗體包裝1g
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體纖維蛋白原(FG)BIX02188 是一種有效的選擇性 MEK5 抑制劑，IC50 為 4.3 nM。 BIX02188 也選擇性抑制 ERK5 活性, IC50 為 810 n
乙醇脫氫酶（ADH）測(cè)試盒50管/48樣滑假絲酵母 3-氨基-5-苯基吡唑白介1Elisa
盤長(zhǎng)孢狀盤孢 苯基膦酸白介11Elisa
中國(guó)臺(tái)灣假黃單胞 對(duì)甲酰基甲酯白介12Elisa
小孢鏈霉 2-苯基-1,3-白介12Elisa
磚紅鐮刀 三羥甲基烷三烯酸酯白介12Elisa
大腸埃希 5-降烯-2-羧酸叔丁酯白介12;23 p40Elisa
根瘤 烷磺酸吡啶鹽白介12 p40Elisa
芹側(cè)耳（杏鮑菇） 2,8-喹啉二白介15Elisa
海神魯杰氏 基乙酸酐白介16Elisa
芽孢桿屬 4-異氧基苯酸白介17Elisa
類銀白紫絲膜 3-三氟甲氧基苯白介17AElisa
釀酒酵母 間三氟酮白介17BElisa
球孢白僵 根皮苷白介17CElisa
Pseudomonas plecoglossicida 尼泊金異丁酯白介17DElisa
海棗曲霉 6,11-二氫二苯并[b,e]硫雜卓-11-酮白介17FElisa
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
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