商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。 測(cè)定原理: AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對(duì)氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對(duì)超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負(fù)相關(guān)。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
Ⅱ型前膠原基端原肽(PⅡNT)英文名:PⅡNT ELISA Kit磷化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體包裝50mg
Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)英文名:CTXⅡ ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框167抗體包裝1g
Ⅱ型膠原(COL2)英文名:COL2 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框168抗體包裝250mg
ⅡD組磷脂A2(PLA2G2D)英文名:PLA2G2D ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框170抗體包裝250mg
ⅡA組磷脂A2(PLA2G2A)英文名:PLA2G2A ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框172抗體包裝1g
Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)英文名:PⅠCP ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框173抗體包裝5g
Ⅰ型前膠原基端原肽(PⅠNP)英文名:PⅠNP ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框174抗體包裝25g
Ⅰ型前膠原(PCⅠ)英文名:PCⅠ ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框177抗體包裝5g
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)英文名:CTXⅠ ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框180抗體包裝1g
Ⅰ型膠原交聯(lián)基端肽(NTXⅠ)英文名:NTXⅠ ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框182抗體包裝1g
Ⅰ型膠原α2(COL1α2)英文名:COL1α2 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框183抗體包裝25g
Ⅰ型膠原α1(COL1α1)英文名:COL1α1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框187抗體包裝5g
Ⅰ型膠原(COL1)英文名:COL1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框189抗體包裝5g
90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)英文名:HSP90β1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框190抗體包裝100ml
90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)英文名:HSP90αA1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框192抗體包裝25ml
輪枝菌Verticillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品乙肝表面抗原大蛋白試劑盒原花青B2;Procyanidin B
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR乙脫氫試劑盒原花青B1;Procyanidin B
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品乙呋試劑盒乙酰紫堇靈;Acetylcorynoli
超氧陰離子清除能力測(cè)試盒100管/96樣 叔丁基二硫抗mannobioside糖抗體Elisa
亮白曲霉 2,2-二氟-3-羥基戊酸乙酯鋅-α2脂蛋白Elisa
烏克蘭毛霉 2-溴-3,4-二氟苯巖藻糖基化觸珠蛋白Elisa
短柄帚霉 6-甲基-3H-噻吩[2,3-d]嘧啶-4-酮膽固-25-羥化Elisa
鼠李糖乳桿 磺S受體自身抗體Elisa
產(chǎn)氣腸桿* 3,5-二溴-2-吡受體Elisa
新疆鹽單胞 5-溴-4-甲基-1H-吲唑S轉(zhuǎn)移Mu1Elisa
禾谷鐮孢 2--3-氟-5-硝基吡啶乙酰CoA羧化Elisa
總狀共頭霉 噻吩并[3,2-b]吡啶-7-蛋白激M2Elisa
大孢聯(lián)軛霉 5-溴吲唑-3-甲酸系統(tǒng)性紅斑狼瘡IgGElisa
黑曲霉 2-乙硫基-5-硝基吡啶系統(tǒng)性紅斑狼瘡IgAElisa
圍小叢殼 L-肌肽鋅系統(tǒng)性紅斑狼瘡IgMElisa
蠟樣芽胞桿 4-苯氧基芐糖化血紅蛋白Elisa
博斯氏屬 2-叔丁苯纖維蛋白單體Elisa
葉球形微桿 4,6-二-2-甲氧基嘧啶酮酸激M2Elisa